| 查看: 2166 | 回复: 0 | ||
candydada516新虫 (初入文坛)
|
[求助]
关于肝组织用蛋白质裂解液和蛋白酶抑制剂的运用
|
|
请问各位虫虫大人： 我最近要做一个关于肝纤维化机理的实验，需要做蛋白芯片方面的，但是 肝组织的蛋白裂解液选择不确定，现在有一个方案，想请大家看后给予意见和建议，方案如下： 1）将组织用包含蛋白酶抑制剂（如aprotinin 或者inhibitor cocktail）和低浓度（小于0.2%）非离子型去垢剂的PBS缓冲液进行匀浆（超声或机械匀浆）。 2）裂解液不要包含任何有机溶剂如DMSO。 3）将组织裂解液离心并将上清液冻存在-20度以下。 4）以裂解液作为matrix加入空白背景孔，标准品以及QC的孔中 参照此建议，我们可以在加了抑制剂的PBS缓冲液中超声或匀浆提取蛋白，用WB或BCA蛋白定量来判断我们的提取效率？以确保先把蛋白提取出来？ 拜托虫虫大人们了~ |
回复此楼» 猜你喜欢
关于豆爷回答的JTJC与%2F数量
已经有4人回复
-
基金中了
已经有11人回复
-
filecode
已经有18人回复
-
听说今天filecode变了
已经有44人回复
-
固定端突然变了，今天
已经有8人回复
-
filecode
已经有11人回复
-
大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑
已经有6人回复
-
一个有机合成实验室都需要哪些设备？
已经有12人回复
-
求各位大神看下
已经有33人回复
-
咨询面上基金
已经有7人回复
找到一些相关的精华帖子，希望有用哦~
提取细胞蛋白
已经有14人回复
- 请大家帮忙分析下我的SDS-PAGE蛋白检测胶啊
已经有26人回复
- 【求助】真菌中已变性的蛋白质的提取方法
已经有5人回复
- 【求助/交流】请问用RIPA裂解液裂解后的蛋白能做ELISA吗？
已经有6人回复
- 【求助/交流】大鼠组织的WB
已经有13人回复
点击这里搜索更多相关资源科研从小木虫开始，人人为我，我为人人
50