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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 液相色谱测定药物浓度
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futurememory

金虫 (小有名气)

[求助] 液相色谱测定药物浓度

HPLC测定一种药物的浓度，反相柱，流动相为50%乙腈50%水，配置了0~100ug/ml的溶液（药物溶解度大约4mg/ml）测定标准曲线。出现了两个问题：
1.现配现测得到的峰面积比放置一天后的溶液测得的峰面积值大40%左右，药物没有析出，理论上也不会水解。
2.样品跑完后，冲洗一段时间，基线稳定，进样针也是每进一次样都会清洗的，但是这时候我再进一针流动相空白样品，依然会在这个药物出峰的位置出峰，这些出峰的药物残留在什么地方呢？
很困惑，向大家求助，谢谢！
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努力地生活着
1楼 2013-01-12 03:35:26
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

orionwei

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1 2013-01-13 12:16:51
futurememory: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢！ 2013-01-15 03:23:43
1.供试品溶液不稳定，放置一天降解了(水解只是一种可能的降解形式，不能说化合物理论上不会水解，就不会通过其他途径降解)
2.有可能是洗针液选择不理想，不能讲进样针上残留的样品完全洗干净。建议你进完一次样后连续进几针空白，看残留峰是不是逐渐减小。
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4楼2013-01-12 22:16:37
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lemonbb8121

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1 2013-01-12 10:35:37
1.考虑换一台仪器试试；
2.换一根柱子试试；
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3楼2013-01-12 07:25:49
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yhyh96

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1 2013-01-13 12:16:55
futurememory: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢！ 2013-01-15 03:24:00
样品本身不稳定，放置后发生反应，化合物变了；
进样阀部分或进样针没洗干净，
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5楼2013-01-12 23:05:36
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Betterboy3185

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1 2013-01-13 12:16:58
futurememory: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-01-15 03:24:18
你的药物是用什么溶剂溶解的啊？如果是用水溶的，而进样之后是用50%水洗脱，两者如果不兼容，会导致样品析出，再进空白，就会看到有峰了！也就是说，药物在100%水和50%水中的溶解度差别很大……
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6楼2013-01-13 11:25:13
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raulsam1984

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
futurememory: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-01-15 03:24:28
楼主，第一个问题，可能是溶剂挥发造成；第二个问题，可能是进样针受污染了，有些时候洗针的溶液不对，残留是洗不掉的，要根据你测定的溶液的性质来定洗针的溶液。
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7楼2013-01-14 16:26:38
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idea2020

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
futurememory: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-01-15 03:24:39
用含有机溶解流动相溶解的样品，有发生了动态平衡的变化的情况；另外就是样品容易残留；过滤可能被吸附。
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8楼2013-01-14 21:45:46
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星星的眼睛

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

这个污染一般在进样部分，可能是进样阵、进样阀或者所配置溶剂的污染
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10楼2013-01-27 23:16:14
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普通回帖

匿名

禁虫 (知名作家)
本帖仅楼主可见
2楼2013-01-12 06:38:37
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tianzhibin

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

样品不是很稳定吧？建议换流动相。
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都在路上，都要努力。
9楼2013-01-23 17:58:20
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