应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR
101/1返回列表
查看: 1247  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yanjiwuluo

新虫 (小有名气)

[求助] PCR

战友们，我用PCR扩增一下我的目的基因，扩增完成后，我用微量核酸测定仪测出来的OD260/280=1.8左右，浓度700ng/ul。但是跑胶时为什么只有marker。目的基因一点都没有
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2013-01-11 10:41:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lovelydong

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
yanjiwuluo: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-01-12 15:08:22
首先你的目的基因片段有多大，跟你的marker是不是匹配。另外你样品孔能否看到引物二聚体的条带？
赞一下 回复此楼
2楼2013-01-11 11:04:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
700ng/ul浓度很高了，跑胶应该可以明显看到的。PCR时的模板没有加多吧？样品如果大量形成引物二聚体也会影响DNA含量的测定。
赞一下 回复此楼
3楼2013-01-11 11:28:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

platanus

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
yanjiwuluo: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-01-12 15:10:42
那说明你测到的是引物二聚体，而不是你的目的条带哦！
赞一下 回复此楼
4楼2013-01-11 17:43:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

尹祥杰

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
yanjiwuluo: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-01-12 15:09:28
使你没有跑出来吧。电压也会有关系的。
赞一下 回复此楼
众浪大化中，不喜也不惧。
5楼2013-01-11 23:30:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yanjiwuluo

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lovelydong at 2013-01-11 11:04:18
首先你的目的基因片段有多大，跟你的marker是不是匹配。另外你样品孔能否看到引物二聚体的条带？

应该与marker匹配的。没有二聚体出现，什么都没有
赞一下 回复此楼
6楼2013-01-12 15:08:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yanjiwuluo

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 尹祥杰 at 2013-01-11 23:30:59
使你没有跑出来吧。电压也会有关系的。

多少合适呢？我的你、目的基因在1000bp左右把
赞一下 回复此楼
7楼2013-01-12 15:09:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yanjiwuluo

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by platanus at 2013-01-11 17:43:46
那说明你测到的是引物二聚体，而不是你的目的条带哦！

这说明我要再提高退火温度吗？有几个有条带但是很弱
赞一下 回复此楼
8楼2013-01-12 15:10:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cory0931

至尊木虫 (文坛精英)

巫山云
怀疑没有扩出来；
赞一下(1人) 回复此楼
锤之千古
9楼2013-01-13 19:36:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yanjiwuluo

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by cory0931 at 2013-01-13 19:36:37
怀疑没有扩出来；

的确没扩增出来，唉，郁闷，难道引物的事？怎么老出问题
赞一下 回复此楼
10楼2013-01-14 20:40:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yanjiwuluo 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 SX5mJmPWDfOO 2026-11-13 3/150 2026-11-15 08:29 by xSrQNSSjcgoX
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 SX5mJmPWDfOO 2026-11-13 3/150 2026-11-15 08:18 by xSrQNSSjcgoX
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 SX5mJmPWDfOO 2026-11-13 3/150 2026-11-15 07:56 by xSrQNSSjcgoX
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 uKOSCocCb6Fm 2026-11-13 3/150 2026-11-15 05:11 by xSrQNSSjcgoX
[论文投稿] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 uKOSCocCb6Fm 2026-11-12 7/350 2026-11-15 03:10 by xSrQNSSjcgoX
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 uKOSCocCb6Fm 2026-11-12 7/350 2026-11-15 02:48 by xSrQNSSjcgoX
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 uKOSCocCb6Fm 2026-11-12 9/450 2026-11-15 02:04 by xSrQNSSjcgoX
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +7 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 10/500 2026-11-15 00:39 by Equinoxhua
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 6/300 2026-11-15 00:24 by Equinoxhua
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 YHiw1gou1Eda 2026-11-10 8/400 2026-11-14 22:20 by Equinoxhua
[考博] 27博士 +6 锦鲤送福至 2026-11-10 6/300 2026-11-14 21:23 by xupeii
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 1Nb0IVlmV6v0 2026-11-11 4/200 2026-11-13 11:18 by Equinoxhua
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 cdqGD6ftHmbl 2026-11-11 5/250 2026-11-12 12:28 by ECLTXnJnRSXf
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 5/250 2026-11-12 11:25 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 8/400 2026-11-12 11:20 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:49 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +7 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 9/450 2026-11-12 09:24 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 3/150 2026-11-12 08:26 by HajghKOMynmz
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 8/400 2026-11-12 05:30 by 9fOTqj074tIg
[考博] 申请环境，微生物方向博士 +3 浅笑09 2026-11-08 3/150 2026-11-10 12:44 by 可淡不可忘
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭