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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 实验室分析、仪器 » 气相色谱分析多糖的结构组成时，用HP-5的柱子可以吗？
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wuxiao549

禁虫 (著名写手)
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仪器、分析 气相色谱测单糖组成

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1楼 2013-01-08 21:08:45
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liweixiaoye

至尊木虫 (著名写手)

正股级巡视员

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
wuxiao549: 金币+20, ★★★★★最佳答案, 谢谢了，写了这么多 2013-01-11 13:31:12
hsd3521: 回帖置顶 2013-01-12 19:31:17
hsd3521: 食品EPI+1 2013-01-12 19:31:25
另外，给你一个适合你的方法：
    参照Wack等人的方法，分别取多糖EPS-1和EPS-2各5 mg，加入2 ml的2 mol/L三氟乙酸(TFA)在120 ºC水解2 h，或加入2 ml的0.2 mol/L TFA在80 ºC水解30 min；水解液减压蒸干后，再加入少量甲醇减压蒸干(重复3次)以除去残留的TFA[9]。
    然后，参照张惟杰报道的方法，制备多糖水解样品的三甲基硅醚衍生物：即向上述的多糖水解样品中加入1 ml吡啶、0.4 ml六甲基二硅氮烷和0.2 ml的三甲基氯硅烷，于80 ºC下反应30 min；再加入1.5 ml蒸馏水并震荡，待溶液分层后，1000 rpm离心10 min，取上层吡啶层进行气相色谱分析[3]。使用Agilent 6890N型气相色谱仪、HP-5色谱柱(5% Phenyl Methyl Siloxane Capillary，30 m × 0.32 mm × 0.25 mm)和火焰离子检测器(FID)，色谱条件如下：以氮气为载气，流速为1 ml/min；进样口和检测器的温度分别为250 ºC 和280 ºC；采用程序升温：起始温度100 ºC维持5 min，以5 ºC/min升至150 ºC，并于150 ºC维持5 min，最后以5 ºC/min升至240 ºC，并于240 ºC维持2 min；采用不分流进样，进样量为1 l。
    同理，按上述方法制备标准单糖的三甲基硅醚衍生物并进行气相色谱分析，根据标准单糖衍生物和样品保留时间保留时间的比较以确定EPS-1和EPS-2的单糖的组成，并根据标准单糖衍生物和样品各色谱峰的面积来计算单糖组成的摩尔比。
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vet_whj
人生短短几个秋，不醉不罢休！
6楼2013-01-11 13:27:03
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liweixiaoye

至尊木虫 (著名写手)

正股级巡视员

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wuxiao549: 金币+10, ★有帮助, 我的标准品是含7个单糖，用非极性跑有两个单糖表品是分不开，请问你做的时候，标品用的几个单糖，条件是什么啊 2013-01-09 11:12:46
这个柱子绝对可以，这个柱子是最适合分析单糖组成的柱子，用程序升温的方法做，分析一个样品不会超过40分钟
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人生短短几个秋，不醉不罢休！
2楼2013-01-08 22:49:08
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remainlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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wuxiao549: 金币+5, ★有帮助, 我用液相做过，不行的，7个标品就出来一个峰，你是怎么做的，分离效果很好吗？ 2013-01-09 11:14:23
为什么分析多糖一定要用气相做呀，用液相的方法不是也可以吗？
而且好多多糖的分析都是用液相的，你如果是多糖分子量很大，用气相分析反而不合适
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3楼2013-01-09 08:48:08
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zcm109

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wuxiao549: 金币+5, ★★★很有帮助, 我是7种，有两种分不开，请问你跑样的条件是什么？ 2013-01-09 19:18:55
这个柱子完全可以 我就用这柱子跑了5种单糖，且都能分开
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Nothing is impossible!
4楼2013-01-09 13:54:27
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