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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 小肽电泳低于5KD的小肽看不到条带
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tigon327

捐助贵宾 (文坛精英)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
imyting: 金币+2, ★有帮助, 前面已经说过，这个我很注意，溴酚蓝还有1cm左右就停了，所以不会跑出去的 2013-01-08 08:58:35
yqbter: 金币+40, 退还金币 2013-01-08 11:39:29
yqbter: 金币+18, 退还金币！ 2013-01-08 11:39:43
wizardfan: 应助指数-1, 楼主7号的时候已经回复过这个问题了，不能算应助 2013-01-17 04:09:03
yqbter: 金币-40, 2013-01-08加错金币了，所以扣除 2013-01-19 15:30:40
yqbter: 金币-18, 2013-01-08加错金币了，所以扣除 2013-01-19 15:31:02
可能是因为电泳时间过长，低分子量marker最下面的两条带跑出去了。建议你最好在溴酚蓝还有约0.5cm左右停止电泳，然后染色，脱色即可。
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11楼2013-01-08 08:49:35
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conanzzz

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
imyting: 金币+10, ★★★很有帮助, 好主意，可以试一下，非常感谢 2013-01-08 09:20:50
Tricine三层胶(浓缩胶3%左右,夹层胶16.5%,分离胶16.5%),恒流20mA 3-5小时；染时可以先用考染至少染出Marker（最小条带不一定分辨率很高），如果条带没有，可以用水把考兰洗干净了继续银染
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12楼2013-01-08 09:13:37
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conanzzz

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

imyting: 金币+58, ★★★很有帮助, 我现在的问题是看不见最后两条MAKER 2013-01-08 09:21:40
yqbter: 金币-40, 楼主操作失误，要求退还金币！ 2013-01-08 11:38:38
yqbter: 金币-18, 楼主操作失误，要求退还金币！ 2013-01-08 11:39:07
供参考，因为18%的胶浓度比较大，感觉4-5H还不够
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13楼2013-01-08 09:16:12
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conanzzz

木虫 (正式写手)
你可以先试下16.5%的胶，看Marker能不能跑出来；有条件的话最好控制在低温电泳；另外谢谢你的金币~~
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14楼2013-01-08 10:00:21
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conanzzz

木虫 (正式写手)
送鲜花一朵
哈哈下回小心莫手滑~~
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15楼2013-01-08 12:01:12
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genda_cto

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

能附一张结果图上来吗？有可能是你电泳的时间不够，1.4kD，3.5kD，6.5kD的条带没分开。也有可能是胶浓度不够。根据前面已经显示出来的带，算出电泳迁移率，估算小肽条带所应该在的位置，来判断是否marker已经降解以及胶浓度是否使用。如果证实了marker没有降解，那就增大胶浓度增大电泳时间试试。注意溴酚蓝指示带并不是电泳中跑得最快的带！
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16楼2013-01-10 13:47:32
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306495799

铁虫 (小有名气)
传张图看看
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也许似乎大概是，然而未必不见得
17楼2013-01-16 21:05:20
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