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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » ge HisTrap FF蛋白纯化柱子使用问题
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vpz2007

木虫 (小有名气)

[求助] ge HisTrap FF蛋白纯化柱子使用问题

请问各位虫友用ge公司的 HisTrap FF 1ml蛋白纯化柱子时，如果纯化同一个蛋白，每次更换binding buffer，咪唑什么的浓度时该怎么清洗这个柱子？如果纯化同一个蛋白，但是两次纯化之间只是相隔一两天该怎么保存？这个预装柱在清洗时需要去除镍离子以及重新装镍吗？
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1楼 2013-01-06 16:51:41
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-01-07 12:10:15
vpz2007: 金币+8, ★★★★★最佳答案, 非常感谢 2013-01-08 19:39:12
elute后迅速用binding buffer洗，把咪唑浓度降下来。然后在用水洗。纯化同一个蛋白的话，不需要很heavy洗，这样就可以了，除非柱子非常脏了。只放一两天的话，直接把柱子封好放在4度就可以了。装好镍的柱子一般不用除镍重装。如果反复用了很多次，镍可能有流失，如果纯化效果变差了，才需要把镍完全除去后重装镍。
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2楼2013-01-07 03:28:53
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