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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 我爱细胞如初恋，细胞伤我千百遍……
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dshlove

木虫 (正式写手)

[交流] 我爱细胞如初恋，细胞伤我千百遍……

求你了，不要污染了……
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1楼2013-01-05 15:22:16
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木虫 (正式写手)
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2楼: Originally posted by liuhui77840 at 2013-01-05 15:40:40
养细胞虽说不是太技术的活，但无菌要求却是挺高的，总是污染的话，就得从你自身找找原因了。
你是否无菌观念不强呀？你是否从刷瓶子那步就没做好呀？你操作的时候有没有不规范的地方呀？
你们的超净台是不是有问题 ...

是转染的细胞总污染
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5楼2013-01-05 16:05:18
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木虫 (正式写手)
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4楼: Originally posted by 成亮 at 2013-01-05 15:44:18
细胞的培养确实很难，我一个同学在做实验中老是失败，之后跟别人学了一遍，别人还帮她做了一篇，之后就成功了，可能就是一些很细微的地方没注意到，看别人做一次，你就可以知道哪些地方没做好了

嗯，细节很重要，其实有时候操作多了也会污染，防不胜防啊。
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6楼2013-01-05 16:06:29
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木虫 (正式写手)
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8楼: Originally posted by rb at 2013-01-05 16:35:39
转染相关的东西不要带出细胞房。而中抽的质粒好像从来没有影响过转染结果，好像不需要特别注意。...

转染之后是没问题的，是补加一倍培养基过夜之后就污染了。
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9楼2013-01-05 16:58:50
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木虫 (正式写手)
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13楼: Originally posted by zhang881007 at 2013-01-06 14:55:34
无菌要点，尽可能保持安全柜的干净，确保整个无菌柜中没有费必需物质。上传你的操作柜的照片，可能给出具体建议。

初步怀疑是加培养基混匀再分出来的过程中出现了污染，因为那些直接补加培养基的没有污染。
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14楼2013-01-06 15:01:22
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木虫 (正式写手)
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11楼: Originally posted by rb at 2013-01-05 20:38:21
也就是长时间培养就污染。培养箱再消消毒吧。...

昨天又转染了1升，今天看没有污染了。
我在转染之前就将细胞分好在瓶子中，然后再去分别转染，然后再分别补加培养基。虽然均一性差一点，但是没有污染。
我前几批补加培养基的操作太多了，污染都不知道在哪一个步骤出现的。
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19楼2013-01-07 09:09:35
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木虫 (正式写手)
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12楼: Originally posted by 王清洪 at 2013-01-06 09:30:38
表示同情！注意细节问题，污染往往在一瞬间。使用的东西最好不要和他人共用！交叉污染，你是不能控制的。祝你好运！

昨天又转染了1升，今天看没有污染了。
我在转染之前就将细胞分好在瓶子中，然后再去分别转染，然后再分别补加培养基。虽然均一性差一点，但是没有污染。
我前几批补加培养基的操作太多了，污染都不知道在哪一个步骤出现的。
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20楼2013-01-07 09:09:46
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木虫 (正式写手)
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13楼: Originally posted by zhang881007 at 2013-01-06 14:55:34
无菌要点，尽可能保持安全柜的干净，确保整个无菌柜中没有费必需物质。上传你的操作柜的照片，可能给出具体建议。

谢谢，我昨天将安全柜彻底清理了下，所有东西都换了。
又转染了1升，今天看没有污染了。
我在转染之前就将细胞分好在瓶子中，然后再去分别转染，然后再分别补加培养基。虽然均一性差一点，但是没有污染。
我前几批补加培养基的操作太多了，污染都不知道在哪一个步骤出现的。
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21楼2013-01-07 09:10:47
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木虫 (正式写手)
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17楼: Originally posted by yayun1990 at 2013-01-07 07:31:23
同感中……

多注意，简化操作步骤，把污染扼杀在摇篮中……
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24楼2013-01-07 09:11:47
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2楼: Originally posted by liuhui77840 at 2013-01-05 15:40:40
养细胞虽说不是太技术的活，但无菌要求却是挺高的，总是污染的话，就得从你自身找找原因了。
你是否无菌观念不强呀？你是否从刷瓶子那步就没做好呀？你操作的时候有没有不规范的地方呀？
你们的超净台是不是有问题 ...

昨天又转染了1升，今天看没有污染了。
我在转染之前就将细胞分好在瓶子中，然后再去分别转染，然后再分别补加培养基。虽然均一性差一点，但是没有污染。
我前几批补加培养基的操作太多了，污染都不知道在哪一个步骤出现的。
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26楼2013-01-07 09:12:15
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4楼: Originally posted by 成亮 at 2013-01-05 15:44:18
细胞的培养确实很难，我一个同学在做实验中老是失败，之后跟别人学了一遍，别人还帮她做了一篇，之后就成功了，可能就是一些很细微的地方没注意到，看别人做一次，你就可以知道哪些地方没做好了

昨天又转染了1升，今天看没有污染了。
我在转染之前就将细胞分好在瓶子中，然后再去分别转染，然后再分别补加培养基。虽然均一性差一点，但是没有污染。
我前几批补加培养基的操作太多了，污染都不知道在哪一个步骤出现的。
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27楼2013-01-07 09:12:30
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木虫 (正式写手)
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10楼: Originally posted by 和谐村 at 2013-01-05 20:13:17
细胞，听话，快快长大！！！


昨天又转染了1升，今天看没有污染了。
先恭喜我吧
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28楼2013-01-07 09:13:17
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dshlove22楼
2013-01-07 09:10   回复  
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15楼: Originally posted by piaoyingaza at 2013-01-06 18:06:09

dshlove23楼
2013-01-07 09:11   回复  
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16楼: Originally posted by yingying1588 at 2013-01-06 18:22:34

dshlove25楼
2013-01-07 09:11   回复  
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18楼: Originally posted by wizardfan at 2013-01-07 07:57:27

dshlove31楼
2013-01-15 10:37   回复  
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30楼: Originally posted by gelois at 2013-01-07 10:24:05

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