应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » DGGE V3区扩增发现新问题，共同交流哈
61/1返回列表
查看: 821  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zhgio

铜虫 (小有名气)

[交流] DGGE V3区扩增发现新问题，共同交流哈

请问各位，做DGGE,V3扩增时出现红圈所示的条带是怎么回事？用的是巢式PCR

9f2f070828381f30c21a5773a9014c086f06f0ed.png
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-12-29 20:06:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zqp9110

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
圈内出现的条带貌似是胶的问题，配胶用的缓冲液pH不对。另外，靠近V3条带附近也有非特异，建议降低模板量重P。
赞一下 回复此楼
2楼2012-12-30 23:31:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhgio

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zqp9110 at 2012-12-30 23:31:40
圈内出现的条带貌似是胶的问题，配胶用的缓冲液pH不对。另外，靠近V3条带附近也有非特异，建议降低模板量重P。

谢谢回复，不过想问如何看出是缓冲液pH不对，可否稍详细的解释下吗，谢谢了！
赞一下 回复此楼
3楼2012-12-30 23:40:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhgio

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zqp9110 at 2012-12-30 23:31:40
圈内出现的条带貌似是胶的问题，配胶用的缓冲液pH不对。另外，靠近V3条带附近也有非特异，建议降低模板量重P。

忘了说了，靠近Maker的两条带是我改了条件做的，原来延伸时间是文献3min（即左边三条带），我改成了30s做的（右边两条），貌似没了红圈对应位置的那条非目的条带，但却拖带及亮度稍差的
赞一下 回复此楼
4楼2012-12-30 23:46:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zqp9110

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhgio at 2012-12-30 23:40:34
谢谢回复，不过想问如何看出是缓冲液pH不对，可否稍详细的解释下吗，谢谢了！...

呵呵，因为我也遇到过这种情况，后来自己重新配制50×TAE就好了。
赞一下 回复此楼
5楼2012-12-31 12:00:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zqp9110

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
zhgio: 金币+2 2013-01-03 14:49:37
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhgio at 2012-12-30 23:46:42
忘了说了，靠近Maker的两条带是我改了条件做的，原来延伸时间是文献3min（即左边三条带），我改成了30s做的（右边两条），貌似没了红圈对应位置的那条非目的条带，但却拖带及亮度稍差的...

哪里的文献会用3min来扩V3？这太长了。我们扩V3都是用touchdown程序，特异性会比较高，循环的三步都是用的1min。
赞一下 回复此楼
6楼2012-12-31 12:02:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhgio 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 3/150 2026-08-25 01:47 by BZKMTicpDhFj
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +7 scalable 2026-08-24 7/350 2026-08-24 23:01 by anata1209
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +7 图啦图啦 2026-08-24 8/400 2026-08-24 22:00 by maomao_da
[论文投稿] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 3/150 2026-08-24 21:59 by BZKMTicpDhFj
[基金申请] 人气不行了 +10 fansofjerry 2026-08-21 10/500 2026-08-24 21:03 by zhanghaozhu
[基金申请] 我面上完蛋了 +9 且听虎啸 2026-08-20 10/500 2026-08-24 20:08 by 苦寒来香
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +17 羊腰板 2026-08-21 19/950 2026-08-24 16:52 by iaeyuan
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 21/1050 2026-08-24 14:21 by refreshing11
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +6 炎黄贵胄 2026-08-22 7/350 2026-08-24 11:58 by 6543yes
[基金申请] 朋友圈看到的 +7 wangzilk 2026-08-18 9/450 2026-08-24 10:50 by cmrandy
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 17/850 2026-08-24 10:20 by echo8914667
[基金申请] 什么时候开奖？ +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭