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DGGE V3区扩增发现新问题,共同交流哈
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zhgio
铜虫
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[交流]
DGGE V3区扩增发现新问题,共同交流哈
请问各位,做DGGE,V3扩增时出现红圈所示的条带是怎么回事?用的是巢式PCR
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2012-12-29 20:06:24
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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zhgio
at 2012-12-30 23:40:34
谢谢回复,不过想问如何看出是缓冲液pH不对,可否稍详细的解释下吗,谢谢了!...
呵呵,因为我也遇到过这种情况,后来自己重新配制50×TAE就好了。
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5楼
2012-12-31 12:00:40
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圈内出现的条带貌似是胶的问题,配胶用的缓冲液pH不对。另外,靠近V3条带附近也有非特异,建议降低模板量重P。
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2012-12-30 23:31:40
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圈内出现的条带貌似是胶的问题,配胶用的缓冲液pH不对。另外,靠近V3条带附近也有非特异,建议降低模板量重P。
谢谢回复,不过想问如何看出是缓冲液pH不对,可否稍详细的解释下吗,谢谢了!
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2012-12-30 23:40:34
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zqp9110
at 2012-12-30 23:31:40
圈内出现的条带貌似是胶的问题,配胶用的缓冲液pH不对。另外,靠近V3条带附近也有非特异,建议降低模板量重P。
忘了说了,靠近Maker的两条带是我改了条件做的,原来延伸时间是文献3min(即左边三条带),我改成了30s做的(右边两条),貌似没了红圈对应位置的那条非目的条带,但却拖带及亮度稍差的
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4楼
2012-12-30 23:46:42
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