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刁寒冰

银虫 (小有名气)

[求助] 脉冲场电泳

求助各位大侠们,有做过脉冲场电泳的没?想问问这是怎么回事?同样的处理方法怎么就有的出条带,有的没有呢?有的点样孔还很亮。
用SmaI 酶切的,酶切四小时,电泳条件:2.2s-54.2s, 6V/cm, 20h, 14°。胶浓度:1%,

hp 2012-12-26 16hr 23min.jpg
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刁寒冰

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by guoyanbiao at 2013-04-18 15:47:14
请问楼主,脉冲场凝胶电泳可以分离出2.3M ,1.8M以及2M之间的基因组条带吗?
是这样的,我的目的菌种含有无法分离的杂菌,我想通过脉冲场凝胶电泳,能分离开2.3M ,1.8M以及2M之间的基因组条带吗?我想通过脉冲场 ...

电泳前不酶切,基因组会不会太大了啊?能跑出来吗?你可以试一下!我没做过不酶切的,这个情况也不是很确定
3楼2013-04-19 09:38:18
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guoyanbiao

铜虫 (小有名气)

请问楼主,脉冲场凝胶电泳可以分离出2.3M ,1.8M以及2M之间的基因组条带吗?
是这样的,我的目的菌种含有无法分离的杂菌,我想通过脉冲场凝胶电泳,能分离开2.3M ,1.8M以及2M之间的基因组条带吗?我想通过脉冲场凝胶电泳,电泳前不酶切,分离开杂菌的基因组,切回目的基因的胶回收,做16S鉴定,谢谢指点
survive and succeed!!!!!!!!
2楼2013-04-18 15:47:14
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