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刁寒冰

银虫 (小有名气)

[求助] 脉冲场电泳

求助各位大侠们，有做过脉冲场电泳的没？想问问这是怎么回事？同样的处理方法怎么就有的出条带，有的没有呢？有的点样孔还很亮。
用SmaI 酶切的，酶切四小时，电泳条件：2.2s-54.2s, 6V/cm, 20h, 14°。胶浓度：1%，

hp 2012-12-26 16hr 23min.jpg
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1楼 2012-12-26 17:43:25
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guoyanbiao

铜虫 (小有名气)
请问楼主，脉冲场凝胶电泳可以分离出2.3M ，1.8M以及2M之间的基因组条带吗？
是这样的，我的目的菌种含有无法分离的杂菌，我想通过脉冲场凝胶电泳，能分离开2.3M ，1.8M以及2M之间的基因组条带吗？我想通过脉冲场凝胶电泳，电泳前不酶切，分离开杂菌的基因组，切回目的基因的胶回收，做16S鉴定，谢谢指点
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survive and succeed!!!!!!!!
2楼2013-04-18 15:47:14
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刁寒冰

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by guoyanbiao at 2013-04-18 15:47:14
请问楼主，脉冲场凝胶电泳可以分离出2.3M ，1.8M以及2M之间的基因组条带吗？
是这样的，我的目的菌种含有无法分离的杂菌，我想通过脉冲场凝胶电泳，能分离开2.3M ，1.8M以及2M之间的基因组条带吗？我想通过脉冲场 ...

电泳前不酶切，基因组会不会太大了啊？能跑出来吗？你可以试一下！我没做过不酶切的，这个情况也不是很确定
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3楼2013-04-19 09:38:18
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