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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 提出的质粒跑胶为什么只在2500bp左右，本来应是是5000多bp的？
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新虫 (初入文坛)

[求助] 提出的质粒跑胶为什么只在2500bp左右，本来应是是5000多bp的？

同上 。是没提好？还是其他的原因？
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1楼 2012-12-24 10:35:17
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Jaaar

银虫 (初入文坛)
从菌液里提取出来的质粒一般是超螺旋(Supercoiled)结构, 在电泳里面的移动速度会比线性结构的快，所以你跑电泳会看到较低的条带
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11楼2013-07-08 11:37:29
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tigertang

木虫 (著名写手)

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★ ★
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没有被注册: 金币+2 2012-12-27 13:40:18
建议上图。质粒提取直接跑胶可能包括不同形式的质粒（超螺旋或线性等），想超螺旋跑的较线性要快，建议找个单个酶切位点的酶切了再跑胶鉴别。
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2楼2012-12-24 12:00:03
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
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小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-12-24 19:12:14
提得好的质粒应该绝大部分是超螺旋的，跑得比marker的线性条带快。如果你5K的质粒真跑到5K的位置，才是没提好呢。想确定质粒的分子量最简单的办法是用单酶切成线性分子，再和marker比较。
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3楼2012-12-24 16:54:14
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desheng101

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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质粒大多数是超螺旋的，和Maker相比，基本没有可比性。你做个单酶切跑胶看一下，再来比对。
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4楼2012-12-24 17:16:25
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