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新虫 (初入文坛)

[求助] 提出的质粒跑胶为什么只在2500bp左右,本来应是是5000多bp的?

同上 。是没提好?还是其他的原因?
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Jaaar

银虫 (初入文坛)

从菌液里提取出来的质粒一般是超螺旋(Supercoiled)结构, 在电泳里面的移动速度会比线性结构的快,所以你跑电泳会看到较低的条带
11楼2013-07-08 11:37:29
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tigertang

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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没有被注册: 金币+2 2012-12-27 13:40:18
建议上图。质粒提取直接跑胶可能包括不同形式的质粒(超螺旋或线性等),想超螺旋跑的较线性要快,建议找个单个酶切位点的酶切了再跑胶鉴别。
2楼2012-12-24 12:00:03
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-12-24 19:12:14
提得好的质粒应该绝大部分是超螺旋的,跑得比marker的线性条带快。如果你5K的质粒真跑到5K的位置,才是没提好呢。想确定质粒的分子量最简单的办法是用单酶切成线性分子,再和marker比较。
3楼2012-12-24 16:54:14
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desheng101

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
质粒大多数是超螺旋的,和Maker相比,基本没有可比性。你做个单酶切跑胶看一下,再来比对。
4楼2012-12-24 17:16:25
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