应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 稳转细胞培养过程中需要加G418吗？
101/1返回列表
查看: 2085  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

cherryfish

金虫 (小有名气)

[求助] 稳转细胞培养过程中需要加G418吗？

最近刚拿到一株稳转细胞株，WB结果是很好的。但不知道现在的培养过程中是否需要加入g418培养？？
希望大侠能指导一下，加入g418的浓度该怎么确定？该什么时候加入？是传代的时候就加呢？还是等细胞贴壁了才能加？？？
多谢了，万分感谢！！！

（PS。我不知道怎么发金币诶。。。。）
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-12-20 14:57:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sarah-miao

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
cherryfish: 金币+1 2012-12-21 09:11:30
呵呵，我也在做，我是PM放在培养基里面直接传代时候加入的，一直用含有抗生素的培养基培养，WB检测蛮好，就等着做后续试验了
赞一下 回复此楼
2楼2012-12-20 15:41:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

onkelhero

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
cherryfish: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-12-21 09:14:29
既然是稳转成功的 就不用总加，传4，5代加一次 保持稳定就行了。
赞一下 回复此楼
3楼2012-12-20 16:37:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

448935271

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
cherryfish: 金币+1, ★有帮助 2012-12-21 09:14:48
你的细胞本来就是稳转了的，还是你想要通过G418筛选得到能够稳转的细胞呢
赞一下 回复此楼
万物皆有毒，只要剂量足
4楼2012-12-20 16:45:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

onkelhero

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

何时加？就是培养时加到培养基里就行了，浓度当然是筛选稳转时的浓度。
赞一下 回复此楼
5楼2012-12-20 16:53:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cherryfish

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by sarah-miao at 2012-12-20 15:41:56
呵呵，我也在做，我是PM放在培养基里面直接传代时候加入的，一直用含有抗生素的培养基培养，WB检测蛮好，就等着做后续试验了

是嘛~  谢谢你的回复，那我学习经验了~~
赞一下 回复此楼
6楼2012-12-21 09:12:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cherryfish

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 448935271 at 2012-12-20 16:45:33
你的细胞本来就是稳转了的，还是你想要通过G418筛选得到能够稳转的细胞呢

是害怕质粒没有整合到染色体上，传代的时候又掉出来了。。。
赞一下 回复此楼
7楼2012-12-21 09:12:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cherryfish

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by onkelhero at 2012-12-20 16:53:55
何时加？就是培养时加到培养基里就行了，浓度当然是筛选稳转时的浓度。

谢谢你的回复！！ 学习了~
赞一下 回复此楼
8楼2012-12-21 09:13:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

448935271

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

那你还得加G418培养几代，等稳定后再撤除
赞一下 回复此楼
万物皆有毒，只要剂量足
9楼2012-12-21 09:46:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangshuo0102

新虫 (初入文坛)
想问下你们G418你们都是在哪买的啊，我在sigma官网上看到很多种，都蒙了不知道应该用哪种，万分感谢
赞一下 回复此楼
10楼2015-09-25 18:39:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 cherryfish 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料专硕英一数二306 +8 z1z2z3879 2026-03-18 8/400 2026-03-23 20:49 by baobaoye
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境，总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
[考研] 一志愿武理材料工程348求调剂 +6 ￣^￣゜汗 2026-03-19 9/450 2026-03-23 19:53 by pswait
[考研] 一志愿中国石油大学（华东） 本科齐鲁工业大学 +4 石能伟 2026-03-17 4/200 2026-03-23 17:51 by 17862566385
[考研] 293求调剂 +3 涛涛Wjt 2026-03-22 5/250 2026-03-22 22:21 by jiangpengfei
[考研] 一志愿北京化工大学070300 学硕336求调剂 +5 vv迷 2026-03-21 8/400 2026-03-22 14:20 by ColorlessPI
[考研] 303求调剂 +5 安忆灵 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:46 by 素颜倾城1988
[考研] 材料工程专硕 348分求调剂 +3 冬辞. 2026-03-17 5/250 2026-03-21 18:47 by 学员8dgXkO
[考研] 297求调剂 +11 戏精丹丹丹 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:47 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +3 .m.. 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:25 by barlinike
[考研] 22 350 本科985求调剂，求老登收留 +3 李轶男003 2026-03-20 3/150 2026-03-21 13:28 by 搏击518
[考研] 307求调剂 +3 wyyyqx 2026-03-17 3/150 2026-03-21 03:20 by JourneyLucky
[考研] 265求调剂 +3 Jack?k?y 2026-03-17 3/150 2026-03-21 03:17 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 Ma_xt 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:05 by JourneyLucky
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +4 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:15 by JourneyLucky
[考研] 一志愿苏州大学材料求调剂，总分315（英一） +5 sbdksD 2026-03-19 5/250 2026-03-20 22:10 by luoyongfeng
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
[考研] 一志愿福大288有机化学，求调剂 +3 小木虫200408204 2026-03-18 3/150 2026-03-19 13:31 by houyaoxu
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭