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清风寨

银虫 (小有名气)

[求助] 将两个基因串联到启动子下面,两个基因都能表达么?

想请问各位大侠,如果我将两个基因GFP、neo基因串联到A3启动子下游,两个基因都是完整的阅读框,中间用内切酶Not I酶切连接。下游再加上加尾信号和反向重复序列。这样子GFP和neo两个基因都能表达么?
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冷风过心变热
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hzjlan

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
43楼: Originally posted by 清风寨 at 2012-12-21 21:51:24
那你知道如果一个基因没有终止子会影响这个基因的表达么...

如果用2A,前面的蛋白肯定不能带终止子,直接转译出一个融合蛋白,然后细胞内的机制会自动在2A的地方把融合蛋白切开,但两个蛋白的氨基酸序列没有变化,可能会带有一点2A的残基,但那个不影响;如果是IRES,前一个蛋白要带终止子,这样前一个蛋白才可以得到,不然只能得到一个融合蛋白跟后一个蛋白。
44楼2012-12-22 00:30:59
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hf2016

金虫 (正式写手)

理论上是中间没有终止子可以融合表达
一切开始于结束之后
2楼2012-12-20 08:53:54
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zhoufeng1982

木虫 (著名写手)

知道了啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊
3楼2012-12-20 08:57:59
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
清风寨: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-12-20 09:15:03
如果中间没有终止子的话是可以的。有终止密码子的话,两个基因可以串联表达。没有去掉了第一个基因的终止密码子的话形成融合蛋白。
4楼2012-12-20 09:10:02
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