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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 基因组步移求助
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elalei1999

铜虫 (小有名气)

[求助] 基因组步移求助

各位大侠，请问一下，为什么在做基因组步移的实验的时候，自己设计的特异性引物要在外显子区内设计，而不能跨内含子/外显子区呢？我不明白的是，既然提取的是DNA，就有外显子和内含子的，引物设计为什么不能跨区呢？
谢谢大家了。
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不抛弃，不放弃！
1楼 2012-12-18 11:08:45
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zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流问题。 2012-12-18 20:03:33
我理解的，应该是引物的位置位于外显子序列中，而步移扩增的序列肯定是很难避开内含子。可能的原因是外显子的序列更具有特异性。
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2楼2012-12-18 12:16:56
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elalei1999

铜虫 (小有名气)
谢谢这位朋友
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不抛弃，不放弃！
3楼2012-12-18 19:54:08
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stanwang626

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
完全可以的，因为步移的特异性本身不高，所以完成之后测序的菌比连T得菌多一些，最有必要的是完成后，必须在此设计引物做PCR验证
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4楼2012-12-20 11:24:52
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