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elalei1999

铜虫 (小有名气)

[求助] 基因组步移求助

各位大侠,请问一下,为什么在做基因组步移的实验的时候,自己设计的特异性引物要在外显子区内设计,而不能跨内含子/外显子区呢?我不明白的是,既然提取的是DNA,就有外显子和内含子的,引物设计为什么不能跨区呢?
谢谢大家了。
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zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流问题。 2012-12-18 20:03:33
我理解的,应该是引物的位置位于外显子序列中,而步移扩增的序列肯定是很难避开内含子。可能的原因是外显子的序列更具有特异性。
2楼2012-12-18 12:16:56
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elalei1999

铜虫 (小有名气)

谢谢这位朋友
不抛弃,不放弃!
3楼2012-12-18 19:54:08
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stanwang626

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
完全可以的,因为步移的特异性本身不高,所以完成之后测序的菌比连T得菌多一些,最有必要的是完成后,必须在此设计引物做PCR验证
4楼2012-12-20 11:24:52
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