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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 配制percoll分层的问题--分离肝窦内皮细胞
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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xjx722

木虫 (小有名气)

[求助] 配制percoll分层的问题--分离肝窦内皮细胞 已有1人参与

请教各位，我们在配制Percoll离心介质的过程中，25%的percoll和50%的直接混在一起了，无法形成分层，这是怎么回事？请指教。我们的做法是：

SPS 50ml配制（使用前配置）：10×PBS 5ml，Percoll原液45ml，pH 7.4，4℃冰箱保存；
50％Percoll液15ml配制（使用时配制）：7.5ml SPS，7.5ml 1×PBS；
25％Percoll液20ml配制（使用时配制）：5ml SPS，15ml 1×PBS。
10×PBS（100ml）：NaCl 8.0g，KCl 0.2g，Na2HP04.12H20 2.9g，KH2P04 0.2g，过滤除菌，4℃保存。

50ml尖底透亮离心管倾斜，用5ml枪头沿管壁缓慢依次加入体积分数为50%的Percoll 15ml，体积分数为25%的Percoll 20ml，10ml非实质细胞悬液。
谢谢了！
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崇高而孤独的事业！
1楼 2012-12-15 21:21:53
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zhouwang

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
4楼2015-06-22 00:00:29
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xjx722

木虫 (小有名气)
肿么没人回答啊！各位帮帮忙！
赞一下 回复此楼
崇高而孤独的事业！
2楼2012-12-17 14:06:27
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dreamerace

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你这个问题解决了么？
我也做这个，跟离心机有关，要用水平离心机，还有你加入25%的percoll的时候要沿着壁小心混层

请问你这个实验已经做完了么？结果怎么样啊？
赞一下 回复此楼
学无止境
3楼2014-06-23 15:35:26
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