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xjx722木虫 (小有名气)
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配制percoll分层的问题--分离肝窦内皮细胞 已有1人参与
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请教各位，我们在配制Percoll离心介质的过程中，25%的percoll和50%的直接混在一起了，无法形成分层，这是怎么回事？请指教。我们的做法是： SPS 50ml配制（使用前配置）：10×PBS 5ml，Percoll原液45ml，pH 7.4，4℃冰箱保存； 50％Percoll液15ml配制（使用时配制）：7.5ml SPS，7.5ml 1×PBS； 25％Percoll液20ml配制（使用时配制）：5ml SPS，15ml 1×PBS。 10×PBS（100ml）：NaCl 8.0g，KCl 0.2g，Na2HP04.12H20 2.9g，KH2P04 0.2g，过滤除菌，4℃保存。 50ml尖底透亮离心管倾斜，用5ml枪头沿管壁缓慢依次加入体积分数为50%的Percoll 15ml，体积分数为25%的Percoll 20ml，10ml非实质细胞悬液。 谢谢了！ |
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