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xjx722木虫 (小有名气)
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配制percoll分层的问题--分离肝窦内皮细胞 已有1人参与
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请教各位,我们在配制Percoll离心介质的过程中,25%的percoll和50%的直接混在一起了,无法形成分层,这是怎么回事?请指教。我们的做法是: SPS 50ml配制(使用前配置):10×PBS 5ml,Percoll原液45ml,pH 7.4,4℃冰箱保存; 50%Percoll液15ml配制(使用时配制):7.5ml SPS,7.5ml 1×PBS; 25%Percoll液20ml配制(使用时配制):5ml SPS,15ml 1×PBS。 10×PBS(100ml):NaCl 8.0g,KCl 0.2g,Na2HP04.12H20 2.9g,KH2P04 0.2g,过滤除菌,4℃保存。 50ml尖底透亮离心管倾斜,用5ml枪头沿管壁缓慢依次加入体积分数为50%的Percoll 15ml,体积分数为25%的Percoll 20ml,10ml非实质细胞悬液。 谢谢了! |
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xjx722
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2楼2012-12-17 14:06:27
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