24小时热门版块排行榜    

查看: 1468  |  回复: 3

xjx722

木虫 (小有名气)

[求助] 配制percoll分层的问题--分离肝窦内皮细胞 已有1人参与

请教各位,我们在配制Percoll离心介质的过程中,25%的percoll和50%的直接混在一起了,无法形成分层,这是怎么回事?请指教。我们的做法是:

SPS 50ml配制(使用前配置):10×PBS 5ml,Percoll原液45ml,pH 7.4,4℃冰箱保存;
50%Percoll液15ml配制(使用时配制):7.5ml SPS,7.5ml 1×PBS;
25%Percoll液20ml配制(使用时配制):5ml SPS,15ml 1×PBS。
10×PBS(100ml):NaCl 8.0g,KCl 0.2g,Na2HP04.12H20 2.9g,KH2P04 0.2g,过滤除菌,4℃保存。

50ml尖底透亮离心管倾斜,用5ml枪头沿管壁缓慢依次加入体积分数为50%的Percoll 15ml,体积分数为25%的Percoll 20ml,10ml非实质细胞悬液。
谢谢了!
回复此楼

» 猜你喜欢

崇高而孤独的事业!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xjx722

木虫 (小有名气)

肿么没人回答啊!各位帮帮忙!
崇高而孤独的事业!
2楼2012-12-17 14:06:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dreamerace

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你这个问题解决了么?
我也做这个,跟离心机有关,要用水平离心机,还有你加入25%的percoll的时候要沿着壁小心混层

请问你这个实验已经做完了么?结果怎么样啊?
学无止境
3楼2014-06-23 15:35:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhouwang

禁虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

4楼2015-06-22 00:00:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xjx722 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +9 kulium 2026-08-21 10/500 2026-08-21 19:19 by 诗眼倦天涯
[基金申请] 科研孤儿太难了 +16 我4大白菜 2026-08-20 17/850 2026-08-21 19:07 by sakuraai
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +15 医学老男孩 2026-08-20 19/950 2026-08-21 18:54 by 医学老男孩
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 14/700 2026-08-21 16:51 by applepetty
[基金申请] 让我中一个面上吧! +11 大萍1987 2026-08-20 13/650 2026-08-21 14:48 by 20120902066
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 13/650 2026-08-21 08:30 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +4 archvillain 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:10 by gatelove
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
信息提示
请填处理意见