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wuyantao910

银虫 (初入文坛)

[求助] 有没有一些细菌产的胞外酶,经过硫酸铵盐析和凝胶柱就很纯了呢???

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生物是一种事业!
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huanancy2012

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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gyesang: 金币+2, 热心的虫子! 2012-12-15 13:56:33
首先这个问题是想纯化蛋白,如液体培养的话,可以分泌到上清中,但硫酸铵是利用盐析的方式将所有的蛋白变性沉淀下来,是粗分离过程。过凝胶柱是细分离,凝胶柱是层析方法的统称,这里包含很多种的,如亲和层析、离子交换层析、分子筛层析等,具体用哪种,得对你分离的蛋白性质有个基本的了解,如分子量、分子极性、等电点,然后再选择合适的分离方法,不可能一步就获得纯化蛋白的,纯化蛋白的工作是行业人士比较费神的工作哟。希望对你的问题有所帮助。
淡定人生!
2楼2012-12-15 03:10:52
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wuyantao910

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by huanancy2012 at 2012-12-15 03:10:52
首先这个问题是想纯化蛋白,如液体培养的话,可以分泌到上清中,但硫酸铵是利用盐析的方式将所有的蛋白变性沉淀下来,是粗分离过程。过凝胶柱是细分离,凝胶柱是层析方法的统称,这里包含很多种的,如亲和层析、离子 ...

我的胞外酶,经过硫酸铵盐析获得区段沉淀,跑完凝胶状跑SDS-page就是单一条带了。
生物是一种事业!
3楼2012-12-17 14:51:30
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