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wuyantao910

银虫 (初入文坛)

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[求助] 有没有一些细菌产的胞外酶，经过硫酸铵盐析和凝胶柱就很纯了呢？？？

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生物是一种事业！

1楼 2012-12-14 21:56:53

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huanancy2012

银虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★
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gyesang: 金币+2, 热心的虫子！ 2012-12-15 13:56:33

首先这个问题是想纯化蛋白，如液体培养的话，可以分泌到上清中，但硫酸铵是利用盐析的方式将所有的蛋白变性沉淀下来，是粗分离过程。过凝胶柱是细分离，凝胶柱是层析方法的统称，这里包含很多种的，如亲和层析、离子交换层析、分子筛层析等，具体用哪种，得对你分离的蛋白性质有个基本的了解，如分子量、分子极性、等电点，然后再选择合适的分离方法，不可能一步就获得纯化蛋白的，纯化蛋白的工作是行业人士比较费神的工作哟。希望对你的问题有所帮助。

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淡定人生！

2楼2012-12-15 03:10:52

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wuyantao910

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引用回帖:

2楼: Originally posted by huanancy2012 at 2012-12-15 03:10:52
首先这个问题是想纯化蛋白，如液体培养的话，可以分泌到上清中，但硫酸铵是利用盐析的方式将所有的蛋白变性沉淀下来，是粗分离过程。过凝胶柱是细分离，凝胶柱是层析方法的统称，这里包含很多种的，如亲和层析、离子 ...

我的胞外酶，经过硫酸铵盐析获得区段沉淀，跑完凝胶状跑SDS-page就是单一条带了。

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生物是一种事业！

3楼2012-12-17 14:51:30

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