应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求如何理解锚定PCR原理，谢谢
51/1返回列表
查看: 4403  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

qwky2010

金虫 (著名写手)

[求助] 求如何理解锚定PCR原理，谢谢 已有1人参与

看了几遍，还是没有搞懂，到底是啥意思，书里说在该方案中两条特异性引物是根据基因上部分序列设计的正反向序列特异性引物，分别用于扩增其3`端5`端的未知序列。见图，照图上所示，第一轮不就把已知序列的侧翼序列扩增出来了吗，为啥还要进行后续的几轮pcr，现在需要了解这个原理，真诚求教与达人，谢谢
图片3.png



图片2.jpg



图片1.jpg

[ Last edited by qwky2010 on 2012-12-12 at 14:43 ]
回复此楼

» 猜你喜欢
天道酬勤
1楼 2012-12-12 14:42:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

引路者

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

纯属个人的理解：
1.锚定PCR的方法和RACE相同，应该就是同样技术的不同名称
赞一下 回复此楼
我的学习就是我对这个世界的歌颂，我的研究就是我对这个世界的敬仰
3楼2015-10-31 11:19:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

qwky2010

金虫 (著名写手)
书上给出的原理，我看了好难理解，可能是我基础知识太差了，请教达人，最好用通俗的语言来描述锚定PCR的原理吧，万分感激了
赞一下 回复此楼
天道酬勤
2楼2012-12-12 14:47:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

引路者

铜虫 (初入文坛)
抱歉我按错了，没说完！！！
1.锚定PCR的方法和RACE相同，应该就是同样技术的不同名称
在反转录的时候加上两个锚定的引物，这个引物能在反转录的时候使得第一链cDNA多出一段序列供PCR的引物结合用（多转录的序列在5‘或3’端，看进行哪一种RACE）
2.实际操作过程中，第一次PCR常没亮带或条带，所以进行第二次PCR（巢式PCR）进行特异性扩增（顺便富集）

以上，建议检索“RACE”，这里有很多相关的资料~
赞一下 回复此楼
我的学习就是我对这个世界的歌颂，我的研究就是我对这个世界的敬仰
4楼2015-10-31 11:23:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 4/200 2026-11-05 23:39 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 6/300 2026-11-05 23:08 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 12/600 2026-11-05 22:57 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 13/650 2026-11-05 22:55 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 15/750 2026-11-05 22:44 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 13/650 2026-11-05 22:44 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 11/550 2026-11-05 22:35 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-05 22:33 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 17/850 2026-11-05 22:24 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 PYZmcHr5kSaq 2026-11-05 5/250 2026-11-05 21:27 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 8/400 2026-11-05 20:43 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 7/350 2026-11-05 20:43 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 8/400 2026-11-05 20:23 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 11/550 2026-11-05 20:21 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 11/550 2026-11-05 20:10 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 6/300 2026-11-05 18:00 by My20PsvIExYO
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 9/450 2026-11-05 17:26 by My20PsvIExYO
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 13/650 2026-11-05 17:15 by My20PsvIExYO
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-05 11:10 by PYZmcHr5kSaq
[基金申请] 各位基础老师们，看完中央《从严治党》的决定后，对学术界更加有信心了吧 +5 iaeyuan 2026-11-01 5/250 2026-11-04 14:43 by jinchengzi
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭