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yjkang6587银虫 (小有名气)
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[求助]
LPS诱导BV2 细胞 NO检测 不出结果 求指导 已有1人参与
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最近在做LPS诱导BV2细胞活化，检测NO，结果发现加LPS组的NO弄度和对照组基本一样，求各位高手给指点迷津。 实验步骤如下： 1.BV2细胞（购自于中科院昆明动物研究所细胞库，编号KCB200770YJ），细胞种在24孔板中，细胞密度是10万个/ml,每个孔里种500微升，培养24h。 2.细胞用PBS洗3次，加入含有LPS的无血清1640培养基，使LPS的终浓度为1微克每毫升，培养24h。 3.取细胞培养上清液50微升，加入等体积的Griess 1和Griess2 试剂，540nm检测吸光度。（NO检测试剂盒购自碧云天生物技术研究所） 脂多糖LPS购自Sigma O111：B4 产品编号L2630。LPS溶于PBS溶液中，配成100微克/ml， 分装在EP管中，每管1ml于-20度保存。 这个实验我重复了五次，NO检测值一直没有明显变化，求各位高人给指点一下，不胜感激 |
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