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yjkang6587银虫 (小有名气)
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LPS诱导BV2 细胞 NO检测 不出结果 求指导 已有1人参与
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最近在做LPS诱导BV2细胞活化,检测NO,结果发现加LPS组的NO弄度和对照组基本一样,求各位高手给指点迷津。 实验步骤如下: 1.BV2细胞(购自于中科院昆明动物研究所细胞库,编号KCB200770YJ),细胞种在24孔板中,细胞密度是10万个/ml,每个孔里种500微升,培养24h。 2.细胞用PBS洗3次,加入含有LPS的无血清1640培养基,使LPS的终浓度为1微克每毫升,培养24h。 3.取细胞培养上清液50微升,加入等体积的Griess 1和Griess2 试剂,540nm检测吸光度。(NO检测试剂盒购自碧云天生物技术研究所) 脂多糖LPS购自Sigma O111:B4 产品编号L2630。LPS溶于PBS溶液中,配成100微克/ml, 分装在EP管中,每管1ml于-20度保存。 这个实验我重复了五次,NO检测值一直没有明显变化,求各位高人给指点一下,不胜感激 |
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