应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 用含2M尿素的Tris-Hcl缓冲液能溶解包涵体吗？
31/1返回列表
查看: 2513  |  回复: 2
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

xiaoxia110

木虫 (正式写手)

[交流] 用含2M尿素的Tris-Hcl缓冲液能溶解包涵体吗？

实验室里原本研究的一种重组蛋白，全是包涵体形式的，而本人接下来做的是将这个蛋白分开两部分，分别进行表达，用大肠杆菌表达了一个重组蛋白，单用Tris-Hcl缓冲液重悬菌体，超声破碎后，跑蛋白电泳，发现上清中有很少量的目的蛋白，基本还是包涵体。但用含2M尿素的Tris-Hcl缓冲液重悬菌体，超声破碎后，发现上清中有不少的目的蛋白，大约将近50％吧。

这是什么原因呢？
1理论上2M的尿素是不溶解包涵体的啊？
2 溶解在2M尿素里的蛋白是变性状态的，还是正常结构的？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-12-09 16:43:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pennchem

专家顾问 (正式写手)
★ ★
xiaoxia110(金币+1): 谢谢参与
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2012-12-09 17:55:40
1理论上2M的尿素是不溶解包涵体的啊？

尿素8M才能完全变性蛋白吧

2 溶解在2M尿素里的蛋白是变性状态的，还是正常结构的？

部分变性吧，你可以试着逐步透析（降低尿素的浓度），然后做酶活检测
赞一下 回复此楼
2楼2012-12-09 17:15:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
kiss200855373楼
2012-12-09 18:04   回复  
xiaoxia110(金币+1): 谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 xiaoxia110 的主题更新
31/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭