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用含2M尿素的Tris-Hcl缓冲液能溶解包涵体吗?
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实验室里原本研究的一种重组蛋白,全是包涵体形式的,而本人接下来做的是将这个蛋白分开两部分,分别进行表达,用大肠杆菌表达了一个重组蛋白,单用Tris-Hcl缓冲液重悬菌体,超声破碎后,跑蛋白电泳,发现上清中有很少量的目的蛋白,基本还是包涵体。但用含2M尿素的Tris-Hcl缓冲液重悬菌体,超声破碎后,发现上清中有不少的目的蛋白,大约将近50%吧。 这是什么原因呢? 1理论上2M的尿素是不溶解包涵体的啊? 2 溶解在2M尿素里的蛋白是变性状态的,还是正常结构的? |
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2楼2012-12-09 17:15:14
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2012-12-09 18:04
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