应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 蛋白
51/1返回列表
查看: 464  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

a71840584

金虫 (正式写手)

[求助] 蛋白

测的SOD、CAT、POD、MDA趋势都很好，但是蛋白测的就很乱，结果最后导致趋势全没了，蛋白就是用考马斯亮蓝测的，标曲一次就测了俩9出来，测蛋白的时候也没出很么问题，为什么这么乱呢，植物在受到损伤体内蛋白是减少的还是增加的能确定吗？我是用0.05mol,pH7.8的磷酸盐缓冲液研磨样品的，里面还含1%的PVP和1mM的EDTA，另外PVP这个东西会和考马斯反应吗？
回复此楼

» 猜你喜欢
再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
1楼 2012-12-05 22:53:11
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a71840584

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by starseacow at 2012-12-06 00:10:29
测定的时候我习惯用考马斯亮蓝染液加水调零，一般分光光度计大于0.8以上的值都不准确...

哦我的是用去离子水调零，你用考马斯调零你的标曲岂不是要过原点，我这次的考马斯确实没配好。。。，刚配完去测标曲的时候没加蛋白的考马斯吸光度有0.7+，放冰箱静止两天后再去测只有0.6，再静置两天再去测只有0.55。。，还有我的标准蛋白是1mg/ml的，测的时候加0.1ml各浓度标蛋测标曲，但是磨完样测蛋白的时候我加0.1ml酶液考马斯就变很蓝所以我要稀释，只取20μL去测蛋白，但是20μL太少了就一滴不容易打出来所以觉着老有误差，我是不是可以吧标准蛋白配的大一点，比如2mg/ml，这样就不用稀释去测蛋白了
赞一下 回复此楼
再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
5楼2012-12-09 20:16:29
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
PVP不会影响考马斯亮蓝法测定蛋白质，有些方法中还专门添加PVP减小酚类对显色反应的影响。楼主的考马斯亮蓝染色液是否配置正确？常见配制方法为100mg考马斯亮蓝G-250溶于50m1  95％乙醇，加入100ml浓磷酸，然后，用蒸馏水补充至1000ml，配好后滤纸过滤。
赞一下 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
2楼2012-12-05 23:05:34
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a71840584

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2012-12-05 23:05:34
PVP不会影响考马斯亮蓝法测定蛋白质，有些方法中还专门添加PVP减小酚类对显色反应的影响。楼主的考马斯亮蓝染色液是否配置正确？常见配制方法为100mg考马斯亮蓝G-250溶于50m1  95％乙醇，加入100ml浓磷酸，然后，用 ...

配的应该没问题吧，配了好多次了，测标曲的时候没问题啊，一次就测到R2=0.9949，我这次配的多。配了2升，最后测标曲的时候，没加蛋白的考马斯亮蓝测吸光度都有0.7多，但是应该没问题吧
赞一下 回复此楼
再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
3楼2012-12-05 23:43:35
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by a71840584 at 2012-12-05 23:43:35
配的应该没问题吧，配了好多次了，测标曲的时候没问题啊，一次就测到R2=0.9949，我这次配的多。配了2升，最后测标曲的时候，没加蛋白的考马斯亮蓝测吸光度都有0.7多，但是应该没问题吧...

测定的时候我习惯用考马斯亮蓝染液加水调零，一般分光光度计大于0.8以上的值都不准确
赞一下 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
4楼2012-12-06 00:10:29
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 289材料与化工（085600）B区求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:20 by mx.yue
[考研] 340求调剂 +5 话梅糖111 2026-03-24 5/250 2026-03-25 06:53 by ilovexiaobin
[考研] 食品专硕 一志愿双一流 328 +3 xiaom99 2026-03-21 4/200 2026-03-24 21:20 by lailaisimei
[考研] 0854 考研调剂 招生了！AI 方向 +5 pk3725069 2026-03-19 17/850 2026-03-24 17:30 by zhouxuan..
[考研] 求调剂 +7 十三加油 2026-03-21 7/350 2026-03-23 23:48 by 热情沙漠
[考研] 361求调剂 +3 Glack 2026-03-22 3/150 2026-03-23 22:03 by fuyu_
[考研] 一志愿上海交大生物与医药专硕324分，求调剂 +5 jiajunX 2026-03-22 5/250 2026-03-23 18:07 by YMU施老师
[考研] 一志愿东华大学化学070300，求调剂 +7 2117205181 2026-03-21 8/400 2026-03-22 22:55 by chixmc
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:09 by 星空星月
[考研] 085600材料与化工306 +4 z1z2z3879 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:44 by ms629
[考研] 一志愿南大，0703化学，分数336，求调剂 +3 收到VS 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:42 by 学员8dgXkO
[考研] 求调剂 +3 .m.. 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:25 by barlinike
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
[考研] 296求调剂 +6 www_q 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:56 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +7 司空. 2026-03-18 7/350 2026-03-20 23:08 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +4 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:15 by JourneyLucky
[考研] 中南大学化学学硕337求调剂 +3 niko- 2026-03-19 6/300 2026-03-20 21:58 by luoyongfeng
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西安交通大学 学硕 354求调剂211或者双一流 +3 我想要读研究生 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:13 by JourneyLucky
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂（0854都可以） +4 xbxudjdn 2026-03-18 4/200 2026-03-20 09:07 by 不168
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭