应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 蛋白
51/1返回列表
查看: 537  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

a71840584

金虫 (正式写手)

[求助] 蛋白

测的SOD、CAT、POD、MDA趋势都很好，但是蛋白测的就很乱，结果最后导致趋势全没了，蛋白就是用考马斯亮蓝测的，标曲一次就测了俩9出来，测蛋白的时候也没出很么问题，为什么这么乱呢，植物在受到损伤体内蛋白是减少的还是增加的能确定吗？我是用0.05mol,pH7.8的磷酸盐缓冲液研磨样品的，里面还含1%的PVP和1mM的EDTA，另外PVP这个东西会和考马斯反应吗？
回复此楼

» 猜你喜欢
再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
1楼 2012-12-05 22:53:11
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a71840584

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2012-12-05 23:05:34
PVP不会影响考马斯亮蓝法测定蛋白质，有些方法中还专门添加PVP减小酚类对显色反应的影响。楼主的考马斯亮蓝染色液是否配置正确？常见配制方法为100mg考马斯亮蓝G-250溶于50m1  95％乙醇，加入100ml浓磷酸，然后，用 ...

配的应该没问题吧，配了好多次了，测标曲的时候没问题啊，一次就测到R2=0.9949，我这次配的多。配了2升，最后测标曲的时候，没加蛋白的考马斯亮蓝测吸光度都有0.7多，但是应该没问题吧
赞一下 回复此楼
再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
3楼2012-12-05 23:43:35
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
PVP不会影响考马斯亮蓝法测定蛋白质，有些方法中还专门添加PVP减小酚类对显色反应的影响。楼主的考马斯亮蓝染色液是否配置正确？常见配制方法为100mg考马斯亮蓝G-250溶于50m1  95％乙醇，加入100ml浓磷酸，然后，用蒸馏水补充至1000ml，配好后滤纸过滤。
赞一下 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
2楼2012-12-05 23:05:34
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by a71840584 at 2012-12-05 23:43:35
配的应该没问题吧，配了好多次了，测标曲的时候没问题啊，一次就测到R2=0.9949，我这次配的多。配了2升，最后测标曲的时候，没加蛋白的考马斯亮蓝测吸光度都有0.7多，但是应该没问题吧...

测定的时候我习惯用考马斯亮蓝染液加水调零，一般分光光度计大于0.8以上的值都不准确
赞一下 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
4楼2012-12-06 00:10:29
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a71840584

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by starseacow at 2012-12-06 00:10:29
测定的时候我习惯用考马斯亮蓝染液加水调零，一般分光光度计大于0.8以上的值都不准确...

哦我的是用去离子水调零，你用考马斯调零你的标曲岂不是要过原点，我这次的考马斯确实没配好。。。，刚配完去测标曲的时候没加蛋白的考马斯吸光度有0.7+，放冰箱静止两天后再去测只有0.6，再静置两天再去测只有0.55。。，还有我的标准蛋白是1mg/ml的，测的时候加0.1ml各浓度标蛋测标曲，但是磨完样测蛋白的时候我加0.1ml酶液考马斯就变很蓝所以我要稀释，只取20μL去测蛋白，但是20μL太少了就一滴不容易打出来所以觉着老有误差，我是不是可以吧标准蛋白配的大一点，比如2mg/ml，这样就不用稀释去测蛋白了
赞一下 回复此楼
再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
5楼2012-12-09 20:16:29
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +12 archvillain 2026-08-15 23/1150 2026-08-15 20:47 by foyo404
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥？ +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭