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1楼 2012-12-05 10:52:29

已阅关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

sportsgenie

铜虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 116.3
帖子: 20
在线: 5.8小时
虫号: 1249993
注册: 2011-03-30
性别: GG
专业: 病原细菌与放线菌生物学

【答案】应助回帖

如果是要分离和鉴定可培养的细菌可以把水样进行一下倍比稀释，然后用2216E培养基进行培养，等长出菌落后挑取尽可能多的菌落分别进行培养，提取基因组DNA后进行16S rDNA扩增和测序分析，通过序列比对能够对这些细菌进行初步的鉴定，再挑你感兴趣的菌进行详细的生理生化鉴定。但这种方法不适合对所有细菌进行鉴定，因为还是有一定随时的。
如果要鉴定海水中所有细菌，可以通过构建16S rDNA文库和高通量测序来实现。具体方法主要是：
1.把海水用0.22um的无菌滤膜进行过滤富集
2.把滤膜提取总的DNA，用16S的通用引物扩增
3.把扩增产物连接到克隆载体上，构建文库
4.挑取阳性克隆分别进行测序和序列比对分析

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3楼2012-12-13 10:36:56