24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1520  |  回复: 10

wang_shan

铁虫 (初入文坛)

[求助] 原代肝细胞培养

我培养的原代肝细胞,第一天还好,到了第二天就开始出现一缕一缕的浑浊,时间越久,浑浊就越多。我以为是双抗的问题,换了新的,还是这样。提取的过程中我又多离心了几次,结果还是一样。所有的东西我都灭了好多次菌了...请问有谁知道这是什么情况啊?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wq0616

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1 2012-12-05 20:19:31
是不是染菌了?培养基浑浊有可能是染菌了。
艰难困苦,玉汝于成。
2楼2012-12-05 15:04:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wang_shan

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wq0616 at 2012-12-05 15:04:48
是不是染菌了?培养基浑浊有可能是染菌了。

可是每一步操作都按照以前那么做的,培养箱也刚消过毒,所有东西都灭了菌,双抗是新的,已经做过四五次了,每次都一样。请问能不能帮忙分析一下是什么地方出了问题啊?
3楼2012-12-05 19:53:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wang_shan

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wq0616 at 2012-12-05 15:04:48
是不是染菌了?培养基浑浊有可能是染菌了。

我仔细想了一下,我培养的肝细胞,从提取出来,四个小时后换液的时候发现里面有一缕缕白色沙子样的东西,不过当时培养基还是澄清的,到第二天的时候才开始出现这种情况。我把几乎所有浑浊的培养基都吸了出来,换上新的,第三天更严重了,还变臭了。请问,是不是提取出来的的时候出了问题啊?有什么经验么?是在是无能为力了。。。
4楼2012-12-07 20:43:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wq0616

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wang_shan at 2012-12-07 20:43:16
我仔细想了一下,我培养的肝细胞,从提取出来,四个小时后换液的时候发现里面有一缕缕白色沙子样的东西,不过当时培养基还是澄清的,到第二天的时候才开始出现这种情况。我把几乎所有浑浊的培养基都吸了出来,换上 ...

不好意思,我也想不出为什么,无能为力了。抱歉,不能帮助你了。
艰难困苦,玉汝于成。
5楼2012-12-07 21:53:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

云淡风轻小刚

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

根据你的描述,我觉得可能是你的原代肝细胞有问题?建议你一步步盘查
6楼2012-12-08 09:41:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wang_shan

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 云淡风轻小刚 at 2012-12-08 09:41:21
根据你的描述,我觉得可能是你的原代肝细胞有问题?建议你一步步盘查

我觉得是肝细胞提取过程中出了问题,正在一步步检查之中。请问,如果酶灌流液中HEPEs少加了好多,用HCL将PH调到7.6后加的胶原酶,会不会是这个的原因啊??因为我这几次一直是胶原酶加少了。谢谢啦!
7楼2012-12-08 15:43:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wang_shan

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 云淡风轻小刚 at 2012-12-08 09:41:21
根据你的描述,我觉得可能是你的原代肝细胞有问题?建议你一步步盘查

您好,我最近一直在查找原因。现在的情况是,用两步灌流法提取出细胞,将其培养的培养板上后,当时就会看到白色细沙状沉淀,培养两天后培养基倒是没变浑浊,可是培养板下面就会结一层白色的膜,把细胞都覆盖住了。我请别人看过了,提取的过程没有问题。请问,能不能帮忙分析一下,是不是酶或者什么溶液有问题啊?或者是发生反应产生的?用percoll分离液分离一下会不会好啊?实在是走投无路了。万分感激啊...
8楼2012-12-31 20:15:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

云淡风轻小刚

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

这个我也不太清楚,我不做原代细胞的提取这方面的工作,对于这些操作不是很了解。不要着急,再找找原因呢!
9楼2013-01-03 13:06:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunflower_J

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

是不是细胞太多 而且贴壁不好 所以看上去像杂菌
10楼2013-08-27 09:55:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wang_shan 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学调剂求助 +10 LULONG1 2026-04-03 12/600 2026-04-08 10:06 by xingguangj
[考研] 070300化学学硕311分求调剂 +16 梁富贵险中求 2026-04-04 17/850 2026-04-07 22:11 by lijunpoly
[考研] 269求调剂 +3 啊啊我我 2026-04-07 3/150 2026-04-07 18:25 by 蓝云思雨
[考研] 085600材料与化工,求调剂 +5 won_qii 2026-04-07 5/250 2026-04-07 17:10 by 啵啵啵0119
[考研] 一志愿南京航空航天大学 材料与化工329分求调剂 +9 Mr. Z 2026-04-05 9/450 2026-04-07 15:30 by 尽舜尧1
[考研] 复试调剂 +9 春日来信- 2026-04-03 9/450 2026-04-07 15:17 by 尽舜尧1
[考研] 334分机械专硕求调剂 +3 蛋花紫菜汤 2026-04-03 3/150 2026-04-07 14:49 by 逍遥cocoa
[考研] 336求调剂,一志愿中科大 +7 墨彧 yuyu 2026-04-06 7/350 2026-04-07 08:58 by Jaylen.
[考研] 285求调剂 +15 哦呦呼o 2026-04-04 17/850 2026-04-06 23:02 by chenzhimin
[考研] 生物学求调剂 一志愿沪9,326分 +6 刘墨墨 2026-04-06 6/300 2026-04-06 19:36 by lijunpoly
[考研] 一志愿南昌大学,085600,344分求调剂 +9 调剂上岸玘 2026-04-05 10/500 2026-04-06 09:30 by dongzh2009
[考研] 一志愿哈尔滨工业大学085600英一数二337分求调剂 +12 lyz0427 2026-04-03 12/600 2026-04-06 06:37 by houyaoxu
[考研] 085600,320分求调剂 +7 大馋小子 2026-04-01 8/400 2026-04-05 21:19 by 学员8dgXkO
[考研] 295求调剂 +8 FZAC123 2026-04-03 8/400 2026-04-05 17:46 by 蓝云思雨
[考研] 能动调剂326专硕 +4 wan112233 2026-04-04 4/200 2026-04-04 22:47 by yu221
[考研] 283求调剂 +4 mcbbc 2026-04-03 5/250 2026-04-04 20:51 by imissbao
[考研] 085601,一志愿厦大334复试被刷求调剂 +13 曾仰之 2026-04-03 15/750 2026-04-04 20:13 by dongzh2009
[考研] 315分 085602 求调剂 +15 26考研上岸版26 2026-04-02 15/750 2026-04-03 12:45 by xingguangj
[考研] 交通运输考试264分求工科调剂 +4 jike777 2026-04-02 4/200 2026-04-02 21:53 by zllcz
[考研] 材料专业求调剂 +10 月月鸟木 2026-04-01 10/500 2026-04-02 12:57 by wxiongid
信息提示
请填处理意见