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阿娇阿娇

新虫 (小有名气)

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[求助] 急求解答，药代组织分布的困惑

三个剂量的血药浓度已经基本做完了，在这里要感谢很多虫友的帮忙，

接下来想要做组织分布，有诸多问题没有解决，希望大家倾情相助，真心谢过
1 测血药浓度时间点是15min,30min,1h,2h,4h,6h,8h,10h,12h 做组织分布的话，选取几个点比较好？

2 组织分布至少要做哪几个脏器？可以直接把一个时间点的6只老鼠的同一脏器一起研磨取上清吗？

3 脏器要怎么制成匀浆？可以用研钵研磨吗？需要加多少的溶液（PBS或生理盐水）到时候怎么算浓度？

PS：样品是用ELISA方法来检测的

[ Last edited by 阿娇阿娇 on 2012-12-3 at 21:05 ]

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1楼2012-12-03 20:38:02

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richbird

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引用回帖:

14楼: Originally posted by wangyuanji at 2012-12-05 14:29:53
我做实验时，也是组织匀浆完，先高速离心（12000rpm/5min），然后取上清进行液液萃取的。有的同学提出，应该直接用匀浆进行萃取，而不能离心后取上清萃取、测定，离心后取上清萃取再测定使某些成分含量显著降低。不 ...

有的同学担心是很有道理的。药物在各组织均有一定的结合能力，而且大部分药物的binding ratio高于50%，甚至达到99%。离心时，部分药物结合在组织上，无法溶解在溶液中，导致上清液的浓度无法代表组织中实际浓度。尤其是用PBS作为匀浆介质时，大部分药物的水溶性都不好，无法溶解在PBS中，要么结合在组织被离心掉，要么游离出来变成沉淀被舍弃。采用这种方法测得的浓度有一定的可能是药物在上清液中的溶解度。