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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 液相HPLC 的两个峰太近了分不开 求高人指点！ 有图
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zjytiantang

金虫 (小有名气)

[交流] 液相HPLC 的两个峰太近了分不开 求高人指点！ 有图

液相HPLC的两个峰离着太近了分不开，求高人指点！
而且保留时间一直是2分多，C18的柱子，流动相从全甲醇~甲醇水~全水，都试过了 现在不想管保留时间了，就想把两个峰分开~ 希望各位大侠多多指点！
样品是没衍生的组氨酸，组氨酸和一个结构改造的组氨酸跑的。

psb.jpg

[ Last edited by zjytiantang on 2012-12-3 at 11:26 ]
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1楼 2012-12-03 09:02:21
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波斯米亚

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
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zjytiantang: 金币+1, 计量学的方法 是不是需要梯度洗脱呢 这个2.5分钟就出峰太早了，梯度洗脱不好用啊 2012-12-03 10:52:13
个人觉得这个甲醇-水或者乙腈-水的体系绝对能跑出来 最好避免太短出峰啊 你这个图上的不知道是什么条件
要是都不行可以用点计量学的方法 分开不难~~
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5楼2012-12-03 09:40:47
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wanghq121

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
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zjytiantang: 金币+1 2012-12-03 10:48:26
先用甲醇-水来跑，你这个柱子根本吸收就出来，甲醇太高了。
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2楼2012-12-03 09:26:40
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wjg6670

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★
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zjytiantang: 金币+1, 跑的是没有衍生的氨基酸 是同一种氨基酸 就是氨基酸结构稍稍做了修改 2012-12-03 10:50:13
物质没被保留，2.5min就想分离，和死时间差不多，UPLC差不多。让别人给建议至少提供分析对象吧。
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3楼2012-12-03 09:30:32
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32862500

木虫 (小有名气)
★ ★ ★
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zjytiantang: 金币+1, 缓冲盐和离子对是什么呢~ 是试剂么 我不太懂分析~ 3Q啦 2012-12-03 10:51:05
xbqewpq: 金币+1, 感谢应助，欢迎常来分析版交流 2012-12-03 20:33:19
你的物质没保留 可以参考如下几种方法
1  换柱，这么短的时间是不能分开的（如亲水柱）
2  换流动相，用缓冲盐或者离子对
3 用正相来体系来试试
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4楼2012-12-03 09:37:38
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