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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 液相HPLC 的两个峰太近了分不开 求高人指点！ 有图
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zjytiantang

金虫 (小有名气)

[交流] 液相HPLC 的两个峰太近了分不开 求高人指点！ 有图

液相HPLC的两个峰离着太近了分不开，求高人指点！
而且保留时间一直是2分多，C18的柱子，流动相从全甲醇~甲醇水~全水，都试过了 现在不想管保留时间了，就想把两个峰分开~ 希望各位大侠多多指点！
样品是没衍生的组氨酸，组氨酸和一个结构改造的组氨酸跑的。

psb.jpg

[ Last edited by zjytiantang on 2012-12-3 at 11:26 ]
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1楼 2012-12-03 09:02:21
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波斯米亚

铁杆木虫 (著名写手)
★
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计量学的方法参考下PARAFAC和ATLD 分辨你这个图肯定是没问题 跑不跑梯度均可 不过感觉你这个貌似用不到 不跑梯度都能出来的~~
还是得明确下 你的实际体系后面一个峰 可能还有其他物质 要么就是峰型比较难看 加酸碱缓冲液 有时能改变下峰型 既然你对时间没要求的话 可以先用水相跑 再换有机相
另外一个要说的同上面的虫友 全水的话保留时间也是这样 很可能是柱效太低了 换个柱子 长短柱都可以试下~~ 感觉就是性质极其类似的东西也不会全水到全有机相都是一个保留时间 柱子的问题可能性大~
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11楼2012-12-03 12:43:40
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wanghq121

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
zjytiantang: 金币+1 2012-12-03 10:48:26
先用甲醇-水来跑，你这个柱子根本吸收就出来，甲醇太高了。
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2楼2012-12-03 09:26:40
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wjg6670

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★
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zjytiantang: 金币+1, 跑的是没有衍生的氨基酸 是同一种氨基酸 就是氨基酸结构稍稍做了修改 2012-12-03 10:50:13
物质没被保留，2.5min就想分离，和死时间差不多，UPLC差不多。让别人给建议至少提供分析对象吧。
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3楼2012-12-03 09:30:32
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32862500

木虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
zjytiantang: 金币+1, 缓冲盐和离子对是什么呢~ 是试剂么 我不太懂分析~ 3Q啦 2012-12-03 10:51:05
xbqewpq: 金币+1, 感谢应助，欢迎常来分析版交流 2012-12-03 20:33:19
你的物质没保留 可以参考如下几种方法
1  换柱，这么短的时间是不能分开的（如亲水柱）
2  换流动相，用缓冲盐或者离子对
3 用正相来体系来试试
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4楼2012-12-03 09:37:38
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