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液相HPLC 的两个峰太近了分不开 求高人指点! 有图
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液相HPLC的两个峰离着太近了分不开,求高人指点! 而且保留时间一直是2分多,C18的柱子,流动相从全甲醇~甲醇水~全水,都试过了 现在不想管保留时间了,就想把两个峰分开~ 希望各位大侠多多指点! ![]() ![]() ![]() 样品是没衍生的组氨酸,组氨酸和一个结构改造的组氨酸跑的。 psb.jpg [ Last edited by zjytiantang on 2012-12-3 at 11:26 ] |
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上几张高效液相色谱的谱图,各位高人帮助分析一下前面的负峰原因,谢谢
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
zjytiantang: 金币+4, 谢谢啦 我去查查全文 2012-12-03 13:56:32
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
zjytiantang: 金币+4, 谢谢啦 我去查查全文 2012-12-03 13:56:32
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组氨酸想做好要衍生化的,不衍生化的就要特殊柱子或者流动相。附一个方法给你参考。 本发明提供了一种用HPLC法分析精氨酸、盐酸精氨酸原料及制剂的方法,所述的分析方法选用LiChroCART250-4,NH2,5μm,4.0×250mm氨基色谱分离柱,以不同pH的有机相和不同离子浓度的缓冲液作为流动相,其中有机相为甲醇、乙醇和乙腈,缓冲液为磷酸氢二铵溶液。所述的分析方法的具体操作步骤如下:(1)取精氨酸4.12-4.20mg、组氨酸4.13-4.25mg和盐酸赖氨酸4.12-4.37mg加流动相20ml溶解并混匀,制成每1ml溶液中含精氨酸为0.206mg/ml-0.21mg/ml、组氨酸为0.206mg/ml-0.212mg/ml和盐酸赖氨酸为0.206mg/ml-0.215mg/ml的混合溶液,作为分析溶液;(2)设置流动相流速为0.8-1.2ml/min,检测波长为205nm,柱温为15-25°C;(3)取制成的分析溶液5-40μL注入液相色谱仪中,进行色谱分析,并记录色谱图。 |
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