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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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zjytiantang

金虫 (小有名气)


[交流] 液相HPLC 的两个峰太近了分不开 求高人指点! 有图

液相HPLC的两个峰离着太近了分不开,求高人指点!
而且保留时间一直是2分多,C18的柱子,流动相从全甲醇~甲醇水~全水,都试过了 现在不想管保留时间了,就想把两个峰分开~ 希望各位大侠多多指点!
样品是没衍生的组氨酸,组氨酸和一个结构改造的组氨酸跑的。

psb.jpg

[ Last edited by zjytiantang on 2012-12-3 at 11:26 ]
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valley_chow

金虫 (正式写手)


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zjytiantang: 金币+4, 谢谢啦 我去查查全文 2012-12-03 13:56:32
组氨酸想做好要衍生化的,不衍生化的就要特殊柱子或者流动相。附一个方法给你参考。
本发明提供了一种用HPLC法分析精氨酸、盐酸精氨酸原料及制剂的方法,所述的分析方法选用LiChroCART250-4,NH2,5μm,4.0×250mm氨基色谱分离柱,以不同pH的有机相和不同离子浓度的缓冲液作为流动相,其中有机相为甲醇、乙醇和乙腈,缓冲液为磷酸氢二铵溶液。所述的分析方法的具体操作步骤如下:(1)取精氨酸4.12-4.20mg、组氨酸4.13-4.25mg和盐酸赖氨酸4.12-4.37mg加流动相20ml溶解并混匀,制成每1ml溶液中含精氨酸为0.206mg/ml-0.21mg/ml、组氨酸为0.206mg/ml-0.212mg/ml和盐酸赖氨酸为0.206mg/ml-0.215mg/ml的混合溶液,作为分析溶液;(2)设置流动相流速为0.8-1.2ml/min,检测波长为205nm,柱温为15-25°C;(3)取制成的分析溶液5-40μL注入液相色谱仪中,进行色谱分析,并记录色谱图。
10楼2012-12-03 12:17:18
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wanghq121

至尊木虫 (著名写手)


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zjytiantang: 金币+1 2012-12-03 10:48:26
先用甲醇-水来跑,你这个柱子根本吸收就出来,甲醇太高了。
2楼2012-12-03 09:26:40
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wjg6670

铁杆木虫 (正式写手)


★ ★
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zjytiantang: 金币+1, 跑的是没有衍生的氨基酸 是同一种氨基酸 就是氨基酸结构稍稍做了修改 2012-12-03 10:50:13
物质没被保留,2.5min就想分离,和死时间差不多,UPLC差不多。让别人给建议至少提供分析对象吧。
3楼2012-12-03 09:30:32
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32862500

木虫 (小有名气)


★ ★ ★
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zjytiantang: 金币+1, 缓冲盐和离子对是什么呢~ 是试剂么 我不太懂分析~ 3Q啦 2012-12-03 10:51:05
xbqewpq: 金币+1, 感谢应助,欢迎常来分析版交流 2012-12-03 20:33:19
你的物质没保留 可以参考如下几种方法
1  换柱,这么短的时间是不能分开的(如亲水柱)
2  换流动相,用缓冲盐或者离子对
3 用正相来体系来试试
4楼2012-12-03 09:37:38
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