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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 亚硝酸盐还原酶酶活测定实验的疑问
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xiangran

禁虫 (初入文坛)
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1楼 2012-11-30 15:08:02
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sun_681991

银虫 (初入文坛)
您好！！我想问一下测定亚硝酸盐还原酶酶活的方法（如下），其中“剧烈震荡终止反应”，请问具体是如何操作的？？？谢谢你啦！！
方法：采用改进后的格里斯试剂染色法进行测
定 ,测定酶活反应体系共250 μL:
0. 1 mol/L磷酸盐缓冲液(pH 6. 5) 125μL,
0. 1 mol/L NaCl    15μL,
0. 1 mol/L NO2     12.5 μL,
0. 1 mol/L MV       7.5μL,
0. 1 mol/L Na2S2O4   40 μL,
酶液              50 μL。
30℃水浴中反应10 min,剧烈振荡终止反应。加
10μL格利斯试剂显色,在520 nm比色测定亚硝酸
盐的变化。酶活定义为:每min还原1μmoL亚硝
酸盐所需要的酶量定义为一个酶活力单位（U）
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我爱香菜!
2楼2015-12-24 09:22:32
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sun_681991

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

您好！！我想问一下测定亚硝酸盐还原酶酶活的方法（如下），其中“剧烈震荡终止反应”，请问具体是如何操作的？？？谢谢你啦！！
方法：采用改进后的格里斯试剂染色法进行测
定 ,测定酶活反应体系共250 μL:
0. 1 mol/L磷酸盐缓冲液(pH 6. 5) 125μL,
0. 1 mol/L NaCl    15μL,
0. 1 mol/L NO2     12.5 μL,
0. 1 mol/L MV       7.5μL,
0. 1 mol/L Na2S2O4   40 μL,
酶液              50 μL。
30℃水浴中反应10 min,剧烈振荡终止反应。加
10μL格利斯试剂显色,在520 nm比色测定亚硝酸
盐的变化。酶活定义为:每min还原1μmoL亚硝
酸盐所需要的酶量定义为一个酶活力单位（U）
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我爱香菜!
3楼2015-12-24 09:23:02
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梦飞扬青春

新虫 (初入文坛)
如果楼主找到适合的方法，能不能分享一下，急等
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4楼2016-03-10 08:30:44
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yuyuwuxin

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

剧烈震荡终止反应的意思是剧烈震荡让酶与氧气接触失活终止反应
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5楼2016-03-10 09:15:59
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