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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于PI细胞核染色的问题
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lw1985mzw

新虫 (小有名气)

[求助] 关于PI细胞核染色的问题

第一次做激光共聚焦，用PI染HELA细胞核，用终浓度10ug/ml的PI染活细胞10min，PBS冲洗3次，每次5min，然后用丙酮固定。结果整个细胞都染上了（如图，绿色是FITC标记的，红色是PI）。
问题： 1、 我的这个问题出在哪儿了？
           2、 PI是不是只能染死细胞？
       3、 细胞固定后PI染色，是不是所有细胞核都能染上？

FITC标记的HELA



PI染色后的hela
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1楼 2012-11-29 20:53:45
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lw1985mzw

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jiangrongcui at 2012-11-30 15:11:46
这个PI 我也做过，我们是染的死细胞，活细胞没有做过。活细胞先用预冷的75%的乙醇处理10-20min，主要是破坏细胞膜，然后再用PI染（5ug/ml），效果还不错呢!

你是多少度染多长时间？染完后PBS洗？
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3楼2012-11-30 17:48:27
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jiangrongcui

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lw1985mzw: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-11-30 17:45:30
这个PI 我也做过，我们是染的死细胞，活细胞没有做过。活细胞先用预冷的75%的乙醇处理10-20min，主要是破坏细胞膜，然后再用PI染（5ug/ml），效果还不错呢!
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2012-11-30 15:11:46
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