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lw1985mzw

新虫 (小有名气)

[求助] 关于PI细胞核染色的问题

第一次做激光共聚焦,用PI染HELA细胞核,用终浓度10ug/ml的PI染活细胞10min,PBS冲洗3次,每次5min,然后用丙酮固定。结果整个细胞都染上了(如图,绿色是FITC标记的,红色是PI)。
问题: 1、 我的这个问题出在哪儿了?
           2、 PI是不是只能染死细胞?
       3、 细胞固定后PI染色,是不是所有细胞核都能染上?

FITC标记的HELA



PI染色后的hela
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jiangrongcui

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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lw1985mzw: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-11-30 17:45:30
这个PI 我也做过,我们是染的死细胞,活细胞没有做过。活细胞先用预冷的75%的乙醇处理10-20min,主要是破坏细胞膜,然后再用PI染(5ug/ml),效果还不错呢!
2楼2012-11-30 15:11:46
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lw1985mzw

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jiangrongcui at 2012-11-30 15:11:46
这个PI 我也做过,我们是染的死细胞,活细胞没有做过。活细胞先用预冷的75%的乙醇处理10-20min,主要是破坏细胞膜,然后再用PI染(5ug/ml),效果还不错呢!

你是多少度染多长时间?染完后PBS洗?
3楼2012-11-30 17:48:27
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