应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 液相
101/1返回列表
查看: 1163  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yaxing2009

银虫 (小有名气)

[求助] 液相

问下大家 我在用液相测定样品的时候 经过条件摸索 最后确定了一个极性比较大的流动相，但是用这个流动相时我样品中含的一些极性小的物质不能出峰（样品爬板的时候出了个杂点），我现在想看看样品的的纯度，用了一个极性小的流动相，杂质和产品都能出峰，就是产品的保留时间很小，请问用这种方法看纯度可行吗？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2012-11-29 16:01:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhg0209asd

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jiangchunyong: 金币+3, 谢谢 2012-11-29 18:29:02
以我的经验是不能的。如果想通过LC来确定：
1. 需要走一个全梯度的方法5%MeOH-100%MeOH 的梯度，如果HPLC需要60min分钟比较合理，UPLC 8min比较合理
2. 最好有DAD检测器，如果加一个MS那就更好了
3. 选择适当波长，如有双键的化合物都会在220nm下有吸收，无双键结构如三萜和长链、脂肪酸等基本无紫外吸收，只能用210nm，如果你使用254nm检测黄酮等类的物质，没有双键的三萜类和脂肪酸类的杂质根本检测不出来。
所以说使用HPLC检测纯度需要很丰富的经验。如果你有标准品只要操作误差控制在合理范围内那就简单多了
赞一下 回复此楼
2楼2012-11-29 16:16:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yaxing2009

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lhg0209asd at 2012-11-29 16:16:18
以我的经验是不能的。如果想通过LC来确定：
1. 需要走一个全梯度的方法5%MeOH-100%MeOH 的梯度，如果HPLC需要60min分钟比较合理，UPLC 8min比较合理
2. 最好有DAD检测器，如果加一个MS那就更好了
3. 选择适当波长 ...

现在的情况是没有标准品，我用公司的液相也比较旧，只有一个泵的那种，更没有DAD和MS了，手动梯度我试过，但是不好操作就放弃了，我用的是乙腈-水的流动相，各个梯度我都试过了，请教大侠我该咋整啊
赞一下 回复此楼
3楼2012-11-29 16:30:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhg0209asd

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
xiaoxiao270: 金币+1 2012-11-30 19:05:02
哇，你那仪器太牛了
试试这5个流动相吧：
1. 5%
2. 20%
3. 50%
4. 80%
5. 90%
每个流动相走20min即可（平衡冲柱时间另算），检测波长210nm
祝你好运
赞一下 回复此楼
4楼2012-11-29 16:50:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Malisa

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1 2012-11-30 19:05:06
那你就用两个流动相做呗！
一个看样品前面的杂质，一个看样品后面的杂质。然后把两个加起来。你可以参考美国药典加巴喷丁的样子，人家就是用的前后洗脱的方法。没有用梯度。乙腈-水的梯度很容易出鬼峰，如果检测波长低，噪音更大。而且做梯度起码要用一个梯度跑5遍以上的空白才能稳定下来做测定，所以不知道你有没有稳定够。不信你看看压力曲线就知道了。
赞一下 回复此楼
5楼2012-11-30 13:30:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Malisa

木虫 (正式写手)
★
xiaoxiao270: 金币+1 2012-11-30 19:05:11
引用回帖:
5楼: Originally posted by Malisa at 2012-11-30 13:30:58
那你就用两个流动相做呗！
一个看样品前面的杂质，一个看样品后面的杂质。然后把两个加起来。你可以参考美国药典加巴喷丁的样子，人家就是用的前后洗脱的方法。没有用梯度。乙腈-水的梯度很容易出鬼峰，如果检测波 ...

一个流动相看前面的杂质，一个流动相看后面的杂质，写错了，不好意思
赞一下 回复此楼
6楼2012-11-30 13:31:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yaxing2009

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by Malisa at 2012-11-30 13:31:47
一个流动相看前面的杂质，一个流动相看后面的杂质，写错了，不好意思...

你说的是先用一个流动相跑一遍然后再换另一个流动相再重新跑一遍然后叠加起来？
赞一下 回复此楼
7楼2012-11-30 13:52:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

misteryl

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1 2012-12-03 21:44:27
你在测纯度的时候，要不用甲醇试试嘛，甲醇洗脱能力不是比乙腈小些嘛，
赞一下 回复此楼
我是新人！！！
8楼2012-12-01 18:33:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

功夫熊猫wzmc

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
xiaoxiao270: 金币+1 2012-12-03 21:44:31
如果产品峰和杂质峰不在溶剂峰前面就可以直接用归一化法看纯度；
如果产品峰保留时间太短你可以尝试一下在流动相中加入表面活性剂或调整流动相比例使有机相比例降低，也许你就可以将产品和杂质完全分开。
赞一下 回复此楼
9楼2012-12-03 19:19:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zgf340631735

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★
karl2100: 金币+1, 谢谢回复！ 2012-12-08 00:02:41
设置两相，梯度洗脱。在一个条件下把多个组分都搞定才好吧……
赞一下 回复此楼
学无止境
10楼2012-12-07 18:00:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yaxing2009 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[文学芳草园] 厉娜 +3 张丹枫1991 2026-11-09 5/250 2026-11-09 16:53 by 张丹枫1991
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 12/600 2026-11-09 13:26 by Equinoxhua
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 15/750 2026-11-09 13:19 by Equinoxhua
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 14/700 2026-11-09 11:52 by GwrQVVR6Oenx
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 16/800 2026-11-09 11:47 by GwrQVVR6Oenx
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 15/750 2026-11-09 11:41 by GwrQVVR6Oenx
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 10/500 2026-11-09 08:00 by IhnEQauGmT3K
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 12/600 2026-11-09 06:32 by l48hFd8Nwae2
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-09 00:14 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-08 23:01 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 9/450 2026-11-08 22:46 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 延安大学回应“副教授留绝笔信”：确已离世，正核实举报内容 +3 yexuqing 2026-11-04 5/250 2026-11-07 13:22 by 苏东坡二世
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:12 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 12/600 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭