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yaxing2009银虫 (小有名气)
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液相
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| 问下大家 我在用液相测定样品的时候 经过条件摸索 最后确定了一个极性比较大的流动相，但是用这个流动相时我样品中含的一些极性小的物质不能出峰（样品爬板的时候出了个杂点），我现在想看看样品的的纯度，用了一个极性小的流动相，杂质和产品都能出峰，就是产品的保留时间很小，请问用这种方法看纯度可行吗？ |
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
jiangchunyong: 金币+3, 谢谢 2012-11-29 18:29:02
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jiangchunyong: 金币+3, 谢谢 2012-11-29 18:29:02
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以我的经验是不能的。如果想通过LC来确定： 1. 需要走一个全梯度的方法5%MeOH-100%MeOH 的梯度，如果HPLC需要60min分钟比较合理，UPLC 8min比较合理 2. 最好有DAD检测器，如果加一个MS那就更好了 3. 选择适当波长，如有双键的化合物都会在220nm下有吸收，无双键结构如三萜和长链、脂肪酸等基本无紫外吸收，只能用210nm，如果你使用254nm检测黄酮等类的物质，没有双键的三萜类和脂肪酸类的杂质根本检测不出来。 所以说使用HPLC检测纯度需要很丰富的经验。如果你有标准品只要操作误差控制在合理范围内那就简单多了 |
2楼2012-11-29 16:16:18
yaxing2009
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