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稀有密码子占多大比例,会影响重组基因的表达?
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xiaohong1213
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]
稀有密码子占多大比例,会影响重组基因的表达?
请大家帮忙啊,真核的一个基因在大肠杆菌中表达,诱导条件已经摸索了将近一个月了,温度,浓度,时间都尝试过了,就是不表达,是不是因为稀有密码子的原因而影响表达,经过一个软件的分析,在引物中有一个精氨酸的稀有密码子,其余位置也有一些稀有密码子,那到底稀有密码子存在多少,会影响到基因的表达?谢谢!
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1楼
2012-11-29 10:57:41
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xiaohong1213
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5楼
:
Originally posted by
susizheng
at 2012-11-29 16:33:56
1、用rosetta菌株,专门用于表达稀有密码子的,全式金有感受态卖;
2、换原核表达试试,毕赤酵母操作也挺方便;
3、全基因合成,按照大肠杆菌的密码子偏好性将序列进行优化,送公司合成。
嗯,谢谢你的建议。我会考虑的。
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6楼
2012-11-29 16:41:17
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sunlk
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【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
必须优化表达,否则根本表达不出来
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2楼
2012-11-29 11:04:47
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xiaohong1213
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2楼
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Originally posted by
sunlk
at 2012-11-29 11:04:47
必须优化表达,否则根本表达不出来
请问具体应该怎样做优化呢?除了温度,浓度,时间这些因素外,还可以怎样优化呢?可以具体说说吗?谢谢!
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3楼
2012-11-29 12:18:48
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【答案】应助回帖
嗯 密码子优化吧 ,送公司 直接合成全基因,现在全基因合成也很便宜
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4楼
2012-11-29 13:46:03
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