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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 3’ RACE
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swimmingcrab

铜虫 (小有名气)

[求助] 3’ RACE

请问下3‘-RACE PCR产物测序后怎么判断序列已经到3'末端了呢？
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1楼 2012-11-21 10:08:39
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swimmingcrab

铜虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by drxiao2005 at 2012-11-22 14:47:43
3'RACE产物的PolyA可能是反转录引物引入的。
通常反转录引物中的polyT会与mRNA的PolyA退火，从而起始反转录反应，并引入polyT远端的heel序列。
但并不能100%保证polyT不会与mRNA上短的A窜（A10或A5TA3）退火。
因 ...

感谢，解答的很详细，请问有没有相关的资料呢？网上没有找到这种详细的解释。因为不是分子生物学出身，背景知识太少，能帮忙提供下资料的话不胜感激
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9楼2012-11-23 08:58:32
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jl860822

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
真核生物的mRNA的3端是有PolyA的存在的
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2楼2012-11-21 12:13:19
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sgs8725

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
把你的测序结果去载体，跟你的中间片段拼接起来，然后看后面有没有一串A
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3楼2012-11-21 13:04:19
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swimmingcrab

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jl860822 at 2012-11-21 12:13:19
真核生物的mRNA的3端是有PolyA的存在的

那这段polyA 大约要多少个呢？ 我的有是有，但是搜一下被认为是载体序列，连接时的载体序列里面也有一串A么？
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4楼2012-11-22 08:54:35
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