24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (4472)
>虫友互识 (284)
>论文投稿 (239)
>文献求助 (228)
>学术会议 (187)
>导师招生 (169)
>博后之家 (139)
>休闲灌水 (120)
>考博 (61)
>硕博家园 (56)
>教师之家 (46)
>攻关文献(高奖励) (43)
>考研 (41)
>基金申请 (36)
>找工作 (27)
>功能材料 (25)

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

应助: 277 (大学生)
金币: 15912.3
散金: 451
红花: 78
沙发: 433
帖子: 21986
在线: 2078.9小时
虫号: 2029722
注册: 2012-09-25
专业: 原子和分子物理

[求助] 扩增基因CDS区域如何设计引物？

请问欲扩增基因CDS区域然后连接载体转染入细胞内表达，引物如何设计？我看到有人说上游引物在起始密码子前照抄20个左右，这是什么意思啊？

回复此楼

» 猜你喜欢

NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析已经有0人回复
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有182人回复
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点已经有0人回复
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂已经有0人回复
氢氧化钾活化操作已经有18人回复
散金已经有68人回复
生物质超级电容器已经有0人回复
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析已经有0人回复
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点已经有0人回复

1楼 2012-11-18 21:44:19

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

应助: 277 (大学生)
金币: 15912.3
散金: 451
红花: 78
沙发: 433
帖子: 21986
在线: 2078.9小时
虫号: 2029722
注册: 2012-09-25
专业: 原子和分子物理

引用回帖:

8楼: Originally posted by lvanmorison at 2012-11-23 21:00:01
比如MYOD1基因，我首先在NCBI找到它的mRNA序列，然后找到它的CDS序列，全部复制下来，在primer 5.0 中，正向引物直接从CDS的第一个核酸开始（比如18bp），反向引物从CDS最后一个核酸开始，向前选择序列（比如17bp） ...

酶切位点以及保护碱基是依据什么加上去的啊？
正向引物和反向引物的序列与mRNA的序列是一样的还是互补的呢？我是用mRNA反转录的cDNA作为模板进行PCR的。