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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

[求助] 扩增基因CDS区域如何设计引物?

请问欲扩增基因CDS区域然后连接载体转染入细胞内表达,引物如何设计?我看到有人说上游引物在起始密码子前照抄20个左右,这是什么意思啊 ?
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
6楼: Originally posted by lvanmorison at 2012-11-22 23:02:02
你是在基因组里面PCR,还是用mRNA来PCR啊?
应该是在基因的CDS序列的前后各设计一个引物,就好了吧。
我也在做这个呢

我是提取细胞总RNA然后用试剂盒反转录成cDNA,用cDNA作为模板扩增基因的CDS区,然后想要转染进细胞中,您说的“应该是在基因的CDS序列的前后各设计一个引物,就好了吧。”可以告诉我具体是怎么设计的吗?多谢啦,本人分子新手,急需帮助。  期待您的回复!
7楼2012-11-23 18:48:19
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

谁能帮帮我啊?愿意赠送金币
3楼2012-11-18 21:45:18
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

照抄后又想输入到PRIMER 5中检验,那粘贴时直接粘呢?还是选择反过来呢?
4楼2012-11-18 21:56:26
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

谁能帮帮我啊??????、、、、
5楼2012-11-22 22:28:29
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