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fly-xu

银虫 (初入文坛)

[求助] 锦葵科植物RNA提取,请各位帮忙!

最近一直在提黄秋葵的RNA,很多多糖杂质,提的时候各种黏糊糊的,各位有人曾经提过的吗?介绍下多糖植物的提取经验吧!万分感谢!上两张图大家给我分析分析吧!
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fly-xu

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by quintas at 2012-11-15 18:02:03
向裂解液里加氯仿后,抽提水相RNA,水相中加异丙醇,静置离心前+盐溶液。
盐溶液:0.8m 柠檬酸钠+1.2m NaCl。
另外,异硫氰酸胍-氯仿抽提、Tris饱和酚纯化植物RNA的抽提方法是最适合从富含多糖多酚及次生代谢物质 ...

多谢!
10楼2012-11-18 18:38:00
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shucanwei

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fly-xu: 金币+3, ★★★很有帮助, 多谢!请问您第二种方法醋酸钠和乙醇的浓度是多少呢? 2012-11-15 09:38:19
我也提RNA,多糖的的物种比较难弄。方法一,用负八十冰冷的丙酮抽提两次。方法二,加十分之一体积的醋酸钠和十分之一乙醇沉淀多糖。方法三,用裂解液抽提两次。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
唯以一人治天下,不以天下奉一人。
2楼2012-11-14 21:29:37
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quintas

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fly-xu: 金币+2, ★★★很有帮助, 多谢! 2012-11-15 09:39:06
建议用柠檬酸钠抽提,除多糖的效果很好,但是因为结合紧密导致微小RNA损失严重,但是能保证纯度。
3楼2012-11-14 23:01:14
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fly-xu

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by quintas at 2012-11-14 23:01:14
建议用柠檬酸钠抽提,除多糖的效果很好,但是因为结合紧密导致微小RNA损失严重,但是能保证纯度。

请问您用的柠檬酸钠浓度是多少呢?我用的是CTAB法,不知道是在那步用柠檬酸钠呢?
4楼2012-11-15 09:41:26
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