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zxy664063437

新虫 (初入文坛)

[求助] 做单克隆测序是菌液好还是菌液PCR后测好?

我扩增一个序列,做克隆,是直接用菌液测序好呢还是用菌液PCR后测好啊?请求指点
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hourl11

禁虫 (初入文坛)

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7楼2012-11-16 09:22:16
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天空2011

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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个人感觉还是菌液好,pcr只做为初步的验证,里面的成分还有可能影响测序结果,还有就是量的问题,反正送公司他们给做了,自己又不麻烦,还是送菌液好点
2楼2012-11-13 23:37:25
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liujianmin68

木虫 (职业作家)

努力发展交叉学科

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
既然你要做克隆,还是把基因片段先连在T载体上,测序是还是用菌液送样,因为PCR产物送样有时候测序结果可能不太好,或者在PCR产物中某些序列是发生突变的,这样测出的结果不一定正确(虽然这样的事情发生的几率比较低)
转向地质微生物学
3楼2012-11-14 09:56:41
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zxy664063437

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by liujianmin68 at 2012-11-14 09:56:41
既然你要做克隆,还是把基因片段先连在T载体上,测序是还是用菌液送样,因为PCR产物送样有时候测序结果可能不太好,或者在PCR产物中某些序列是发生突变的,这样测出的结果不一定正确(虽然这样的事情发生的几率比较 ...

可是我送的菌液,人家说浓度低,很多都测不出来,送PCR的话一次就测出来了,下次我再试试
4楼2012-11-15 12:00:16
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