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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 做单克隆测序是菌液好还是菌液PCR后测好?
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zxy664063437

新虫 (初入文坛)

[求助] 做单克隆测序是菌液好还是菌液PCR后测好?

我扩增一个序列，做克隆，是直接用菌液测序好呢还是用菌液PCR后测好啊？请求指点
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1楼 2012-11-13 20:46:09
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hourl11

禁虫 (初入文坛)
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zxy664063437
7楼2012-11-16 09:22:16
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天空2011

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
个人感觉还是菌液好，pcr只做为初步的验证，里面的成分还有可能影响测序结果，还有就是量的问题，反正送公司他们给做了，自己又不麻烦，还是送菌液好点
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2楼2012-11-13 23:37:25
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liujianmin68

木虫 (职业作家)

努力发展交叉学科

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
既然你要做克隆，还是把基因片段先连在T载体上，测序是还是用菌液送样，因为PCR产物送样有时候测序结果可能不太好，或者在PCR产物中某些序列是发生突变的，这样测出的结果不一定正确（虽然这样的事情发生的几率比较低）
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转向地质微生物学
3楼2012-11-14 09:56:41
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zxy664063437

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by liujianmin68 at 2012-11-14 09:56:41
既然你要做克隆，还是把基因片段先连在T载体上，测序是还是用菌液送样，因为PCR产物送样有时候测序结果可能不太好，或者在PCR产物中某些序列是发生突变的，这样测出的结果不一定正确（虽然这样的事情发生的几率比较 ...

可是我送的菌液，人家说浓度低，很多都测不出来，送PCR的话一次就测出来了，下次我再试试
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4楼2012-11-15 12:00:16
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