24小时热门版块排行榜    

查看: 3063  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zxy664063437

新虫 (初入文坛)

[求助] 做单克隆测序是菌液好还是菌液PCR后测好?

我扩增一个序列,做克隆,是直接用菌液测序好呢还是用菌液PCR后测好啊?请求指点
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zxy664063437

新虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by hourl11 at 2012-11-16 09:22:16
我们都是送质粒的,浓度高一点。因为菌液本身没有质粒好保存啊,要是配送的时间耽搁了,就会对菌液的活力有影响,再者,菌液送到之后还要活化再提质粒,未必比我们自己提的好,这期间稍微有点差错,他们就会把原因归 ...

谢谢
10楼2012-11-16 22:08:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

天空2011

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
个人感觉还是菌液好,pcr只做为初步的验证,里面的成分还有可能影响测序结果,还有就是量的问题,反正送公司他们给做了,自己又不麻烦,还是送菌液好点
2楼2012-11-13 23:37:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liujianmin68

木虫 (职业作家)

努力发展交叉学科

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
既然你要做克隆,还是把基因片段先连在T载体上,测序是还是用菌液送样,因为PCR产物送样有时候测序结果可能不太好,或者在PCR产物中某些序列是发生突变的,这样测出的结果不一定正确(虽然这样的事情发生的几率比较低)
转向地质微生物学
3楼2012-11-14 09:56:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zxy664063437

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by liujianmin68 at 2012-11-14 09:56:41
既然你要做克隆,还是把基因片段先连在T载体上,测序是还是用菌液送样,因为PCR产物送样有时候测序结果可能不太好,或者在PCR产物中某些序列是发生突变的,这样测出的结果不一定正确(虽然这样的事情发生的几率比较 ...

可是我送的菌液,人家说浓度低,很多都测不出来,送PCR的话一次就测出来了,下次我再试试
4楼2012-11-15 12:00:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 要骂人了,新模版改版就是要淡化问题凝练这种虚的东西,结果有个评委还在说凝练得不够 +8 瞬息宇宙 2026-08-31 15/750 2026-09-02 11:13 by ma0526
[基金申请] 我不理解! +18 Edward_pc 2026-08-26 26/1300 2026-09-02 11:01 by shanzhipu
[基金申请] 科研人应该花精力去思考如何解决问题,而不是去凝练问题 +4 瞬息宇宙 2026-09-01 8/400 2026-09-02 10:35 by 瞬息宇宙
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 8/400 2026-09-02 02:42 by Leogzhya
[基金申请] 面上合作单位盖章 +6 ssyjh 2026-08-27 9/450 2026-09-01 20:01 by huagongfeihu
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 基金不中,共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
信息提示
请填处理意见