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tulip1213

银虫 (小有名气)

[求助] pB121SmaI酶切

最近做克隆,很纠结已经做了很长时间,选择单酶切,载体也去磷酸化了死活构不上,
无奈对载体进行改构,引入SmaI位点,测序也测过了。改构确实引入了SmaI位点。但是做过一次,仍然不灵。
想问各位:
碰到SmaI 切,怎么处理?
是先用SmaI30度切,酚氯仿去酶,再加另一酶,还是直接加入另外一酶。
今天对改构的pBI121酶切鉴定,请各位帮我判断一下,载体有没被SmaI或SacI切动?泳道依次是Marker,质粒,SmaI,SacI,SmaI+SacI(应放出750bp条带)
双酶切怎么看不出切出的条带?

问.jpg

[ Last edited by tulip1213 on 2012-11-11 at 00:11 ]
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hchen82

禁虫 (小有名气)

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6楼2012-11-28 10:53:37
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