24小时热门版块排行榜    

查看: 3848  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

20111987

金虫 (正式写手)

[求助] 如何辨别引物之间是否能够形成引物二聚体

以下是我用到的两对引物序列,大家帮忙看一下是不是很容易形成引物二聚体啊,为什么我试了各种方法,扩增出来的都只有二聚体没有目的条带,但是内参却扩增出来的很好,不知道什么原因呀
5′-AGCATCATGCCACCTACGTGA-3′
5′-CACCACCATTGAATTTCAGCG-3′


5′CGAGCTCGAACCTGTAATCAGCCATG 3′
5′GGGGTACCGCTGATATTCTTCCAGTTG 3′
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

20111987

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by tupac225 at 2012-11-09 23:21:39
自己看看引物3'端末端是否有互补序列,这样的话容易造成引物以引物为模板进行延伸,行成引物二聚体。
我觉得还是你的引物设计的不好,

可是我的引物是按照文献中用过的引物合成的呀,我就是不明白为什么人家论文里面能扩增出来,而我却做不出来呢。
3楼2012-11-10 08:09:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

tupac225

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
20111987: 金币+3, 有帮助 2012-11-12 08:10:10
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-11-12 14:35:33
自己看看引物3'端末端是否有互补序列,这样的话容易造成引物以引物为模板进行延伸,行成引物二聚体。
我觉得还是你的引物设计的不好,
coasttocoast。
2楼2012-11-09 23:21:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dsm1026

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
别人文献里的模板跟你的模板是一样的吗?还有。你的引物内部之间可能会形成发夹结构。
4楼2012-11-10 09:03:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

20111987

金虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by dsm1026 at 2012-11-10 09:03:17
别人文献里的模板跟你的模板是一样的吗?还有。你的引物内部之间可能会形成发夹结构。

不是一样的,但是处理是相同的,感觉我的模板肯定有该基因的,不知道为何扩增不出来。
5楼2012-11-12 08:12:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 8/400 2026-09-01 12:58 by ssyjh
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 15/750 2026-09-01 12:23 by icm639
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 基金不中,共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
信息提示
请填处理意见