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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 如何失活耐高温酶
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jessenju

木虫 (正式写手)

[求助] 如何失活耐高温酶

最近想用耐高温酶比如Tag ligase， Taq polymerase之类的在60度反应，但是反应后想失活，不知道有什么好的办法没有。单纯的加热到95度貌似不能失活，因为做PCRde时候Taq polymerase就是加热到了95度，请各位帮帮忙，谢谢。
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1楼 2012-11-08 11:49:11
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bbwalkman

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jessenju: 金币+4, ★有帮助 2012-11-08 18:17:33
一般如果是金属离子依赖的酶，你可以尝试加一下EDTA，但是就是不知道会不会对你后续试验有影响。。。。。
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5楼2012-11-08 15:08:31
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屿iland

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jessenju: 金币+5, ★有帮助, 谢谢帮助 2012-11-08 13:34:38
加热不能失活就用其他的方法，比如加有机溶剂，加重金属

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2012-11-08 11:53:12
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jessenju

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 屿iland at 2012-11-08 11:53:12
加热不能失活就用其他的方法，比如加有机溶剂，加重金属

除了有机溶剂或者重金属呢，我不想引入太多的别的东西
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3楼2012-11-08 13:35:15
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weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jessenju: 金币+5, ★有帮助 2012-11-08 18:15:22
可以试试加盐离子，调pH值啊之类的方法呗~或者用柱子纯化去除蛋白……
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4楼2012-11-08 14:26:25
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