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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 如何判断蛋白酶是酸性蛋白酶还是碱性蛋白酶
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梅闲寒笑

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-11-08 17:25:19
引用回帖:
8楼: Originally posted by lym8947 at 2012-11-08 10:18:38
谢谢，但是我想请问一下测定蛋白酶酶活的时候缓冲液应该是用哪种啊，我看了国标的方法，中性蛋白酶，碱性蛋白酶和酸性蛋白酶所用的缓冲液都是不一样的啊...

不同的缓冲液有不同的缓冲范围，，找一个尽量宽泛点的缓冲液，，
也或者在不同缓冲液，酸性，碱性，中性条件下，分别测定酶活力，在绘制到图表，以pH值为横坐标，酶活力值为纵坐标，绘制折线图，就会看到了，，
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水墨丹青
11楼2012-11-08 14:55:24
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
rainwander: 金币+5, MicEPI+1, 鼓励交流 2012-11-09 08:43:29
引用回帖:
8楼: Originally posted by lym8947 at 2012-11-08 10:18:38
谢谢，但是我想请问一下测定蛋白酶酶活的时候缓冲液应该是用哪种啊，我看了国标的方法，中性蛋白酶，碱性蛋白酶和酸性蛋白酶所用的缓冲液都是不一样的啊...

Cloning and identification of novel cellulase genes from uncultured microorganisms in rabbit cecum and characterization of the expressed cellulases（封毅AMB2007）
Optimal pH were tested by the enzyme assays at 37°C in buffers of different pH (citrate–phosphate buffer, pH 3.0∼7.0; 0.1 M sodium–phosphate buffer, pH 6.0∼8.0;0.1 M Tris–HCl buffer, pH 7.0∼9.0; 0.1 M glycine–NaOH buffer, pH 8.6∼10.0).

图片1.jpg
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
12楼2012-11-08 23:25:09
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lym8947

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 梅闲寒笑 at 2012-11-08 14:55:24
不同的缓冲液有不同的缓冲范围，，找一个尽量宽泛点的缓冲液，，
也或者在不同缓冲液，酸性，碱性，中性条件下，分别测定酶活力，在绘制到图表，以pH值为横坐标，酶活力值为纵坐标，绘制折线图，就会看到了，，...

哦，明白了，呵呵，谢谢你了，这下我是彻底明白啦，哈哈
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13楼2012-11-09 10:13:03
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lym8947

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2012-11-08 23:25:09
Cloning and identification of novel cellulase genes from uncultured microorganisms in rabbit cecum and characterization of the expressed cellulases（封毅AMB2007）
Optimal pH were tested by the enzy ...

额，这个是不是说用上面不同的缓冲液配制不同的pH环境，然后测定酶活呢？？？
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14楼2012-11-09 10:16:01
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lym8947

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 清一色2011 at 2012-11-08 14:24:44
看是溶解于碱性溶液还是酸性溶液.

这个应该是行不通的，呵呵，酶不是说溶解于什么溶液吧
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15楼2012-11-09 10:18:04
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匿名

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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16楼2012-11-09 11:52:04
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)
引用回帖:
14楼: Originally posted by lym8947 at 2012-11-09 10:16:01
额，这个是不是说用上面不同的缓冲液配制不同的pH环境，然后测定酶活呢？？？...

对
17楼2012-11-09 15:46:46
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