24小时热门版块排行榜    

查看: 1609  |  回复: 13
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

梦不落张

铜虫 (小有名气)

[求助] 组织分布样品制备方法

最近在做五种成分在大鼠肾组织分布实验,样品制备方法为:将大鼠肾称重,加4倍10%氨水-生理盐水,剪碎匀浆,取组织匀浆液400ul,加500ng/ml混标和内标各50ul,加2倍量甲醇(1ml),涡旋10min,离心(13000rpm,10min,4℃)后取上清液1ml,加10%氨水-生理盐水1ml,加3ml乙酸乙酯,涡旋10分钟后离心(3000rpm,10min,4℃),取上清液50℃氮气吹干,加500ul10%乙腈复溶,13000rpm,4℃离心15min,取上清液进样。
问题:样品复溶离心后溶液上层有混悬液体,曾试过用0.22um滤膜过滤进样但过滤后两种成分检测不出。也试过只取中间澄清层进样,但柱子前端筛板堵了,求各位高手相助解决下样品制备方法啊!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangyuanji

银虫 (小有名气)


PSA: 金币+1, 赞 2012-12-06 13:00:56
乙醚麻醉处死大鼠,经左心室心脏灌注,至流出液几乎无血色。取脑。剥除脑膜,称重,按1:1(w/v)加入生理盐水手动匀浆,匀浆液置于5毫升EP管中,12000RPM/5MIN。取上清500微升,加有机溶剂萃取,涡旋,离心,取上层有机相,减压挥干溶剂,少量甲醇复溶(浓集),涡旋,高速离心,进样测定。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

心态比能力重要
5楼2012-11-07 16:13:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

wangyuanji

银虫 (小有名气)


jiangchunyong: 金币+1, 谢谢 2012-11-07 14:55:00
没有做过肾脏的,做过脑的。挥干溶剂,复溶,进样前高速离心,没有混悬。会不会是肾脏特有的不易被高速离心去除掉的油状物质?不然,你试试肾脏灌注,将肾脏中残余的尿液等物质冲洗干净,再进行匀浆处理。没有做过,所以只能说这么多。祝你好运!
心态比能力重要
2楼2012-11-06 22:04:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梦不落张

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wangyuanji at 2012-11-06 22:04:49
没有做过肾脏的,做过脑的。挥干溶剂,复溶,进样前高速离心,没有混悬。会不会是肾脏特有的不易被高速离心去除掉的油状物质?不然,你试试肾脏灌注,将肾脏中残余的尿液等物质冲洗干净,再进行匀浆处理。没有做过, ...

可以具体说下你怎么处理的脑吗
3楼2012-11-07 08:54:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kkbyb

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
使用的复溶溶剂溶解性对待测物来说合适吗?
4楼2012-11-07 14:39:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 11408 一志愿西电,277分求调剂 +3 zhouzhen654 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:03 by laoshidan
[考研] 材料专硕326求调剂 +5 墨煜姒莘 2026-03-15 5/250 2026-03-16 21:30 by 木瓜膏
[考研] 材料专硕306英一数二 +4 z1z2z3879 2026-03-16 6/300 2026-03-16 19:38 by z1z2z3879
[考研] 304求调剂 +4 ahbd 2026-03-14 4/200 2026-03-16 16:48 by 我的船我的海
[考研] 0703化学调剂 +6 妮妮ninicgb 2026-03-15 9/450 2026-03-16 16:40 by houyaoxu
[考研] 0703化学调剂 290分有科研经历,论文在投 +7 腻腻gk 2026-03-14 7/350 2026-03-16 10:12 by houyaoxu
[考研] 中科大材料专硕319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-13 3/150 2026-03-14 18:10 by houyaoxu
[基金申请] 面上和青基一样限30页不合理 +5 wowsunflower 2026-03-10 7/350 2026-03-14 17:21 by kingkocxr
[考研] 复试调剂 +4 z1z2z3879 2026-03-14 5/250 2026-03-14 16:30 by JourneyLucky
[考研] 调剂 +3 13853210211 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:47 by JourneyLucky
[考研] 招收0805(材料)调剂 +3 18595523086 2026-03-13 3/150 2026-03-14 00:33 by 123%、
[考研] 26考研调剂 +3 ying123. 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:18 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +6 邱gl 2026-03-12 7/350 2026-03-13 23:24 by 邱gl
[考研] 341求调剂 +4 番茄头--- 2026-03-10 4/200 2026-03-13 23:12 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +7 7712b 2026-03-13 7/350 2026-03-13 21:42 by peike
[考研] 268求调剂 +4 好运连绵不绝 2026-03-12 4/200 2026-03-13 10:45 by hyswxzs
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +3 d如愿上岸 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:43 by houyaoxu
[考研] 283求调剂,材料、化工皆可 +8 苏打水7777 2026-03-11 10/500 2026-03-13 09:06 by Linda Hu
[考研] 333求调剂 +3 152697 2026-03-12 4/200 2026-03-13 07:08 by Iveryant
[考研] 化工0817调剂 +8 灿若星晨 2026-03-10 8/400 2026-03-10 22:44 by 星空星月
信息提示
请填处理意见