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组织分布样品制备方法
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最近在做五种成分在大鼠肾组织分布实验,样品制备方法为:将大鼠肾称重,加4倍10%氨水-生理盐水,剪碎匀浆,取组织匀浆液400ul,加500ng/ml混标和内标各50ul,加2倍量甲醇(1ml),涡旋10min,离心(13000rpm,10min,4℃)后取上清液1ml,加10%氨水-生理盐水1ml,加3ml乙酸乙酯,涡旋10分钟后离心(3000rpm,10min,4℃),取上清液50℃氮气吹干,加500ul10%乙腈复溶,13000rpm,4℃离心15min,取上清液进样。 问题:样品复溶离心后溶液上层有混悬液体,曾试过用0.22um滤膜过滤进样但过滤后两种成分检测不出。也试过只取中间澄清层进样,但柱子前端筛板堵了,求各位高手相助解决下样品制备方法啊! |
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