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汕头大学海洋科学接受调剂
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轻清1106

铜虫 (小有名气)


[交流] 配制PCR反应体系在碎冰上好,还是经-80℃冰冻过的冰上好呢? 已有38人参与

近期将碎冰于前天放至-80℃冰箱,第二天取出用,省去等制冰机制冰的时间。在这个冰上配制PCR反应体系,有些药品会凝固。稀释的DNA最多用3-4天就会慢慢降解,P出来的结果越来越不理想。这是因为-80℃冰导致的么?各位有经验的都出来交流交流咯。。。
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zhanggz

银虫 (正式写手)

★ ★ ★
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小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-11-05 20:11:06
一般的PCR反应,像现在的天气用不用冰都没有关系。Taq酶提取时需要在4度冰箱里透析了两天。不过在冰上心里感觉会好些,PCR体系不稳定还是从其他方面找原因,应该不是酶的问题。用-80的冰有点夸张了!
6楼2012-11-05 11:45:12
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静安jingan

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
碎冰的好吧,其实没关系的啊
让复杂的事情变简单,简单的事情更简单
2楼2012-11-05 10:46:57
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

新鲜制的冰就可以了
jiayoubashaonian
3楼2012-11-05 11:20:01
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阿留申

铜虫 (初入文坛)

★ ★ ★
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小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-11-05 20:10:38
加酶之前放不放冰上都无所谓,加酶之后最好放在冰上,因为加了Taq酶(该酶在很大温度范围内都是有活性的),体系就会反应,可能会对我们扩增的片段有一定的影响。但是如果做得样比较少时,这些没太大影响,如果做得样多,不放冰上可能影响比较大!希望对你能有些帮助
4楼2012-11-05 11:24:54
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